Anticorps monoclonal de lapin anti-Calréticuline (Validé KO) pour WB, IHC-P, ELISA – P27797

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Calréticuline

• La Calréticuline, également connue sous le nom de CRP55, calréguline, ERp60, HACBP et grp60, est codée par le gène CALR.
• Elle agit comme une chaperonne liant le calcium qui favorise le repliement, l'assemblage oligomérique et le contrôle qualité des glycoprotéines nouvellement synthétisées dans le réticulum endoplasmique via le cycle calréticuline/calnexine.
• En tant que lectine résidente du RE, elle interagit de manière transitoire avec presque toutes les glycoprotéines monoglucosylées synthétisées dans le RE. Références associées : PMID:7876246
• La Calréticuline médie également l'export nucléaire du récepteur des glucocorticoïdes (NR3C1) en se liant à son domaine de liaison à l'ADN. Références associées : PMID:11149926
• Au niveau subcellulaire, elle se trouve principalement dans la lumière du RE, mais est également présente dans le cytosol, à la surface cellulaire, dans la matrice extracellulaire, ainsi que dans les vésicules cytoplasmiques telles que les granules corticaux et cytolytiques.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la formation de ponts disulfure, l'acétylation, l'hydroxylation et la N-glycosylation, contribuant à sa régulation structurelle et fonctionnelle.
• La Calréticuline est impliquée dans la régulation de l'expression des gènes maternels et l'homéostasie calcique lors de la maturation des ovocytes, et pourrait participer au blocage de la polyspermie après la fécondation.
• UniProt indique son poids moléculaire comme 48 142 Da ; l'anticorps reconnaît une bande d'environ 47 kDa par Western blot.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 18–203 de la Calréticuline humaine (NP_004334.1), correspondant au domaine N-terminal ; cette région est hautement conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique d'environ 47 kDa est attendue ; utilisez des contrôles de charge appropriés et validez dans des lysats cellulaires ou tissulaires connus pour exprimer la Calréticuline.
• La validation KO confirme la spécificité de l'anticorps ; envisagez d'utiliser des lignées cellulaires isogéniques de type sauvage et des lignées cellulaires knockout pour la Calréticuline comme contrôles négatifs dans vos expériences.
• En immunohistochimie (coupes en paraffine, IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire ; optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions de détection pour vos échantillons spécifiques.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; associez-le à des anticorps appariés appropriés et validez-le dans la matrice biologique pertinente.

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