Anticorps polyclonal anti-CAD pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27708

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CAD

• Le CAD est une protéine multifonctionnelle qui assure les trois premières activités enzymatiques de la voie de biosynthèse de novo des pyrimidines : la carbamoylphosphate synthétase (CPSase), l'aspartate transcarbamylase (ATCase) et la dihydroorotase (DHOase).
• La fonction CPSase se déroule en deux étapes : un domaine glutamine-dépendant amidotransférase (GATase) génère de l'ammoniac, qui est ensuite utilisé par le domaine carbamoyl phosphate synthétase dépendant de l'ammonium pour produire du carbamoyl phosphate à partir d'ATP et de bicarbonate.
• L'ATCase catalyse la formation du carbamoyl-L-aspartate à partir du L-aspartate et du carbamoyl phosphate.
• La DHOase catalyse la cyclisation du carbamoyl aspartate en dihydroorotate, achevant les étapes initiales de la synthèse de l'UMP.
• Le CAD se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau.
• Il est sujet à l'acétylation et à la phosphorylation, et fonctionne comme une enzyme allostérique dépendante du zinc et des métaux.
• Des mutations du CAD sont associées au trouble congénital de la glycosylation de type 1Z (CDG1Z) et à l'encéphalopathie épileptique et du développement 50 (DEE50/EIEE50).
• Les noms alternatifs pour CAD incluent Carbamoyl phosphate synthetase 2-aspartate transcarbamylase-dihydroorotase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région C-terminale (aa 1650-1900) du CAD humain ; tenez-en compte lors de l'interprétation des données dans les études de troncation ou d'isoforme.
• Pour le western blot, attendez-vous à une bande d'environ 243 kDa ; utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert appropriés pour les protéines de haut poids moléculaire.
• En IHC-P et IF/ICC, une coloration cytoplasmique et nucléaire peut être observée ; incluez des contrôles appropriés et optimisez la fixation/perméabilisation.
• Validez l'anticorps dans votre type d'échantillon et votre application spécifiques en réalisant une série de dilutions, car les concentrations de travail optimales peuvent varier.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; confirmez les performances dans ces espèces si elles font partie de votre système expérimental.

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