Anticorps polyclonal de lapin anti-CA5A pour WB, IF/ICC, ELISA - P35218

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CA5A

• CA5A (anhydrase carbonique 5A), également appelée carbonate déshydratase VA (CA-VA), est une enzyme mitochondriale appartenant à la famille des alpha-anhydrases carboniques.
• Catalyse l'hydratation réversible du dioxyde de carbone en bicarbonate, une réaction de lyase dépendante du zinc essentielle à la régulation du pH et au métabolisme intermédiaire (PubMed:8356065, PubMed:24530203). Références associées : PMID:8356065 PMID:24530203
• Fournit du bicarbonate (HCO3-) dans la matrice mitochondriale, ce qui est essentiel à l'activité des enzymes métaboliques clés du cycle de l'urée et du cycle de Krebs (PubMed:24530203). Références associées : PMID:24530203
• Encodé par le gène CA5A (GeneID: 763) chez l'homme ; l'épissage alternatif peut produire plusieurs variants de transcrits.
• Se localise spécifiquement dans la mitochondrie, son import étant médié par un peptide de transit mitochondrial N-terminal.
• Présente un ion zinc essentiel à l'activité catalytique lié au site actif, caractéristique des anhydrases carboniques.
• Les mutations de CA5A sont associées à des maladies mitochondriales, dont l'hyperammoniémie, dues à une altération de la fonction du cycle de l'urée.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (résidus 39–305) correspond à la protéine CA5A mature après import mitochondrial et clivage du peptide de transit, ce qui permet potentiellement une détection spécifique de la forme maturée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 35 kDa est attendue ; optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps, et validez avec des lysats de contrôle positif issus de tissus exprimant fortement CA5A (par exemple, foie, rein).
• En immunofluorescence/ICC, une coloration mitochondriale doit être observée ; une co-coloration avec un marqueur mitochondrial est recommandée pour confirmer la localisation.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la conformité d'un lot à l'autre peut varier ; réalisez un titrage pour chaque nouvelle application et envisagez d'utiliser un anticorps secondaire constant.

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