Anticorps polyclonal de lapin anti-BTC pour WB et ELISA - P35070

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de BTC

• La pro-bêtacelluline (BTC) est un membre de la famille du facteur de croissance épidermique (EGF), synthétisée sous forme de précurseur transmembranaire qui est clivé par protéolyse afin de libérer le facteur de croissance mature.
• La BTC agit comme un ligand à haute affinité pour EGFR, ERBB4 et d’autres membres de la famille des récepteurs de l’EGF, jouant le rôle d’un mitogène puissant pour les cellules épithéliales pigmentaires rétiniennes et les cellules musculaires lisses vasculaires.
• Elle contient un domaine caractéristique de type EGF avec des ponts disulfure conservés, essentiels à sa structure tridimensionnelle et à sa liaison au récepteur.
• Au niveau subcellulaire, la BTC est localisée dans la membrane cellulaire sous forme de précurseur, puis sécrétée dans l’espace extracellulaire après maturation.
• La BTC est principalement exprimée dans le pancréas et l’intestin grêle, mais elle est également synthétisée dans divers autres tissus et cellules tumorales, ce qui suggère des fonctions à la fois dans la physiologie normale et dans le cancer.
• Parmi ses caractéristiques supplémentaires figurent une glycosylation liée à l’azote et une unique hélice transmembranaire, ce qui la classe comme une protéine membranaire de type I.
• L’entrée du protéome de référence souligne son identification par des approches de protéomique fondées sur la spectrométrie de masse, confirmant son expression endogène.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé pour produire cet anticorps correspond au domaine extracellulaire de la BTC humaine (acides aminés 32–178), ce qui exclut le peptide signal (aa 1–31) et inclut la région présumée du facteur de croissance mature. Par conséquent, l’anticorps devrait reconnaître à la fois le précurseur de pleine longueur et la protéine mature clivée.
• En Western blot (WB), une bande d’environ 20 kDa est détectée dans des conditions réductrices, ce qui concorde avec le poids moléculaire prédit du monomère mature de BTC. Il est recommandé d’utiliser des conditions réductrices et non réductrices afin d’observer les formes liées par des ponts disulfure.
• La BTC est une protéine sécrétée ; ainsi, dans les lysats cellulaires, elle peut être enrichie dans les fractions membranaires ou concentrée dans les milieux conditionnés. Pour les échantillons tissulaires, le pancréas et l’intestin grêle sont recommandés comme contrôles positifs.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut servir de réactif de capture ou de détection, mais les concentrations de travail et les associations optimales doivent être validées dans la matrice d’échantillon concernée.

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