Anticorps polyclonal de lapin anti-BRIP1 pour WB et ELISA - Q9BX63

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BRIP1

• BRIP1 code pour la protéine du groupe J de l'anémie de Fanconi (FANCJ), également connue sous le nom d'hélicase C-terminale associée à BRCA1 (BACH1) et protéine 1 interagissant avec BRCA1. Elle appartient à la famille des hélicases DEAH et contient un domaine cluster fer-soufre 4Fe-4S critique pour son activité hélicase.
• Fonctionne comme une ATPase dépendante de l'ADN et une hélicase ADN 5'-3' qui maintient la stabilité chromosomique en résolvant les structures secondaires de l'ADN pendant la réplication et la réparation. Références associées : PMID:11301010 PMID:14983014 PMID:16116421
• Joue un rôle clé dans la voie de l'anémie de Fanconi (FA), agissant en aval de l'ubiquitination de FANCD2 pour réparer les pontages interbrins de l'ADN. Facilite la réparation par recombination homologue des cassures double brin de l'ADN via son interaction avec BRCA1. Références associées : PMID:14983014 PMID:16153896
• Élimine les pontages ADN-protéine associés aux sites abasiques aux fourches de réplication par le dépliement induit par l'hélicase des adduits HMCES, permettant la clivage médié par SPRTN et la résolution de la lésion. Références associées : PMID:16116421 PMID:36608669
• Déroule les hybrides ARN:ADN et les structures d'ADN G-quadruplex (G4) ; le déroulement des G4 nécessite une queue d'ADN simple brin en 5', indiquant une spécificité pour les substrats associés à la réplication. Références associées : PMID:14983014 PMID:18426915 PMID:20639400
• Se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, avec une expression ubiquitaire et des niveaux les plus élevés dans les testicules. Subit des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation et l'acétylation, et les mutations de BRIP1 sont liées à l'anémie de Fanconi et à une prédisposition au cancer.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux 260 acides aminés N-terminaux de BRIP1, ce qui peut permettre de reconnaître les isoformes de pleine longueur et les isoformes N-terminales potentielles. Vérifier la spécificité en utilisant des contrôles appropriés ou des modèles de knockdown/knockout.
• Pour le Western blot, BRIP1 a un poids moléculaire prédit d'environ 141 kDa. Optimiser les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire et charger suffisamment de protéines (par exemple, 30–50 µg d'extrait nucléaire) en raison d'une expression endogène typiquement faible.
• Dans les applications ELISA, utiliser une protéine BRIP1 recombinante (par exemple, le fragment immunogène) comme antigène de revêtement positif et valider la linéarité/la plage dynamique avec des dilutions en série.
• Les agents génotoxiques (par exemple, la mitomycine C ou le cisplatine) peuvent réguler à la hausse l'expression de BRIP1 ou modifier sa localisation sous-cellulaire ; envisager un prétraitement des cellules pour améliorer la détection.

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