Anticorps polyclonal anti-BRG1/SMARCA4 pour WB, IF/ICC, ELISA - P51532

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BRG1/SMARCA4

• SMARCA4 (BRG1) est le régulateur de la chromatine dépendant de l'actine associé à la matrice, apparenté à SWI/SNF, sous-famille A, membre 4, également connu sous les noms BAF190A, protéine BRG-1, SNF2-beta et activateur transcriptionnel BRG1.
• Agit comme un remodelateur de chromatine dépendant de l'ATP, modifiant les contacts ADN-histone pour réguler la transcription de gènes spécifiques. Références associées : PMID:15075294, PMID:29374058, PMID:30339381
• Composant central des complexes de remodelage de la chromatine SWI/SNF ; au cours du développement neural, il participe aux complexes npBAF et nBAF avec un changement de sous-unité pendant la différenciation.
• Il agit comme corépresseur de ZEB1 pour réguler la transcription de l'E-cadhérine et est nécessaire à la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM) induite par le TGF-beta. Références associées : PMID:20418909
• Il se localise dans le noyau, où il s'associe à la chromatine et exerce sa fonction de remodelage.
• Il colocalise avec ZEB1 dans les cellules négatives pour l'E-cadhérine des lignées établies, le stroma du côlon normal et au front d'invasion des carcinomes colorectaux.
• Il est soumis à l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination ; il possède un bromodomaine et des domaines ATPase, avec une activité de liaison à l'ARN.
• Les mots-clés indiquent son implication dans la surdité et le handicap intellectuel (variants pathologiques), et la protéine subit un épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (aa 30-130) de SMARCA4 humain ; cette région est relativement conservée et peut détecter plusieurs isoformes ou membres apparentés de la famille.
• Compte tenu du poids moléculaire élevé (185 kDa), utilisez un gel SDS-PAGE à 6–8 % d'acrylamide pour une séparation optimale en western blot ; un transfert à basse tension sur une durée prolongée est recommandé.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, prévoyez une perméabilisation nucléaire et un contre-colorant nucléaire pour confirmer la localisation ; l'enrichissement des fractions nucléaires peut améliorer le signal.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans votre système cellulaire ou tissulaire concerné, surtout si une réactivité croisée avec d'autres espèces est attendue, car les données officielles de réactivité croisée sont limitées à l'homme.
• La performance en ELISA peut dépendre de la conformation de l'antigène ; un format compétitif ou sandwich utilisant le peptide immunogène comme étalon peut être envisagé.

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