Anticorps polyclonal anti-BRCA1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BRCA1

• BRCA1 est une protéine de susceptibilité au cancer du sein de type 1 qui fonctionne comme une protéine à doigt RING et une ligase E3 d'ubiquitine-protéine, médiant spécifiquement la formation de chaînes de polyubiquitine liées à la 'Lys-6', ce qui est crucial pour la réparation des dommages à l'ADN et la stabilité génomique. Références associées : PMID:10500182, PMID:12887909, PMID:12890688

• L'hétérodimère BRCA1-BARD1 orchestre la réparation des dommages à l'ADN, l'ubiquitination et la régulation transcriptionnelle, assurant l'intégrité génomique. Références associées : PMID:12890688, PMID:14976165, PMID:20351172

• BRCA1 est nécessaire pour les arrêts du cycle cellulaire induits par les rayonnements ionisants à la fois en phase S et en phase G2, contribuant à un contrôle approprié des points de contrôle. Références associées : PMID:10724175, PMID:11836499, PMID:12183412

• Elle régule la nucléation des microtubules centrosomiques, impactant la ségrégation des chromosomes et la fidélité mitotique. Références associées : PMID:18056443

• BRCA1 facilite la réparation par recombination homologue en interagissant avec PALB2, ce qui favorise le chargement de BRCA2-RAD51 au niveau des cassures de l'ADN. Références associées : PMID:19369211

• De plus, BRCA1 inhibe la synthèse des lipides en se liant à l'ACACA phosphorylée inactive et agit comme un activateur transcriptionnel pour moduler l'expression des gènes. Références associées : PMID:16326698, PMID:20160719

• La protéine subit une phosphorylation et une acétylation et contient un domaine de type doigt à zinc RING essentiel pour son activité de ligase E3. BRCA1 se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, avec une certaine présence cytoplasmique. Les isoformes 1 et 3 sont largement exprimées, tandis que l'isoforme 3 est souvent réduite ou absente dans les lignées cellulaires de cancer du sein et de l'ovaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une région située entre les acides aminés 901-1000 ; cette région centrale peut reconnaître la BRCA1 pleine longueur et potentiellement certaines isoformes.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires avec une expression connue de BRCA1 (par exemple, HeLa, MCF-7) en raison de la grande taille de la protéine (~208 kDa) ; assurez des conditions d'électrophorèse sur gel et de transfert appropriées.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire ; validez l'anticorps dans des tissus congelés ou inclus en paraffine selon les protocoles standard.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour la détection nucléaire et cytoplasmique.
• L'ELISA peut être utilisé pour détecter des fragments recombinants de BRCA1 ou pour cribler des anticorps ; envisagez des stratégies d'anticorps appariés pour l'ELISA sandwich.

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