Anticorps polyclonal anti-BRCA1 pour WB et ELISA - P38398

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de BRCA1

• BRCA1 est une phosphoprotéine nucléaire de 208 kDa qui agit comme une ligase E3 de l'ubiquitine-protéine, en favorisant spécifiquement la formation de chaînes de polyubiquitine liées à la lysine 6. Références associées : PMID:10500182, PMID:12887909, PMID:12890688
• En tant que composant de l'hétérodimère BRCA1-BARD1, il joue un rôle central dans la réparation des dommages à l'ADN, en coordonnant la recombinaison homologue, les points de contrôle du cycle cellulaire et la régulation transcriptionnelle afin de maintenir la stabilité génomique. Références associées : PMID:12890688, PMID:14976165, PMID:20351172
• Il est nécessaire à l'arrêt approprié du cycle cellulaire après une irradiation ionisante, durant les phases S et G2, ainsi qu'au ciblage de FANCD2 vers les sites de dommages de l'ADN. Références associées : PMID:10724175, PMID:11836499, PMID:12183412, PMID:12887909
• Il contribue à la réparation par recombinaison homologue grâce à son interaction directe avec PALB2, facilitant le recrutement de la machinerie de réparation BRCA2-RAD51 au niveau des cassures de l'ADN. Référence associée : PMID:19369211
• Il régule également la nucléation des microtubules centrosomaux, inhibe la synthèse des lipides en se liant à l'ACACA phosphorylée inactive et agit comme activateur transcriptionnel. Références associées : PMID:18056443, PMID:16326698, PMID:20160719
• Il est largement exprimé sous forme des isoformes 1 et 3 ; l'isoforme 3 est réduite ou absente dans plusieurs lignées cellulaires de cancer du sein et de l'ovaire.
• Il est modifié post-traductionnellement par phosphorylation, acétylation et ubiquitination ; il contient un doigt de zinc de type RING et est classé comme suppresseur de tumeur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région N-terminale (acides aminés 100–200) de BRCA1 humain. La nature polyclonale peut entraîner la reconnaissance de plusieurs épitopes ; envisagez une préadsorption si une spécificité élevée est requise.
• Pour le Western blot, prévoyez une bande principale autour de 208 kDa. Optimisez le pourcentage de gel (par exemple 6–8 %) et les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection ; la dilution optimale et le couple d'anticorps doivent être déterminés empiriquement.
• Une réactivité croisée avec BRCA1 murin a été observée ; validez les performances si l'anticorps est utilisé dans des modèles murins.

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