Anticorps monoclonal anti-BRAF V600E pour WB - P15056

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de BRAF

• BRAF (proto-oncogène B-Raf) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui transmet les signaux mitogéniques de la membrane cellulaire au noyau.
• Il phosphoryle MAP2K1, activant ainsi la voie de transduction du signal des MAP kinases. Références associées : PMID:21441910 / PMID:29433126
• Il phosphoryle PFKFB2, contribuant à la régulation métabolique. Références associées : PMID:36402789
• BRAF pourrait jouer un rôle dans les réponses postsynaptiques des neurones de l’hippocampe. Références associées : PMID:1508179
• Il est localisé dans le noyau, le cytoplasme et la membrane cellulaire.
• BRAF est principalement exprimé dans le cerveau et les testicules.
• La protéine subit d’importantes modifications régulatrices, notamment une phosphorylation, une acétylation, une méthylation et une ubiquitination, et contient un domaine à doigts de zinc. La mutation V600E entraîne une activité kinase constitutive et constitue un facteur oncogénique majeur.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Le peptide immunogène couvre les acides aminés 507–606, incluant le codon V600 ; par conséquent, cet anticorps est conçu pour détecter le mutant BRAF V600E.
• Pour le western blot, le poids moléculaire attendu est d’environ 84 kDa. Valider à l’aide de lignées cellulaires humaines connues pour exprimer la mutation V600E, avec des témoins de type sauvage.
• Pour l’immunofluorescence et l’immunocyt chimie, optimiser les conditions de fixation et de perméabilisation en fonction du contexte cellulaire.
• Lors de la réalisation d’un ELISA, envisager un revêtement avec le peptide immunisant ou la protéine BRAF mutante recombinante afin d’évaluer la spécificité de l’anticorps.
• Une réactivité croisée est rapportée chez l’humain ; la réactivité avec d’autres espèces doit être testée individuellement.

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