Anticorps polyclonal anti-BNIP3 pour WB, IHC-P, ELISA - Q12983

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BNIP3

• BNIP3 (protéine interagissant avec la protéine de 19 kDa BCL2/adénovirus E1B 3) est un membre pro-apoptotique de la famille BCL2 capable de surmonter la suppression de la survie médiée par BCL2 et de participer au répartitionnement du calcium entre les compartiments intracellulaires.
• Elle joue un rôle clé dans le contrôle qualitatif mitochondrial en interagissant avec SPATA18/MIEAP, induisant la dégradation des protéines mitochondriales endommagées via la voie MALM (processus catabolique des protéines mitochondriales).
• Avec BNIP3L/NIX, BNIP3 régule la formation d'un pore dans la double membrane mitochondriale, permettant la translocation de protéines lysosomales vers la matrice mitochondriale pour le renouvellement de l'organite.
• BNIP3 est impliquée dans la mort cellulaire induite par la calprotectine (S100A8/A9), reliant la signalisation immunitaire innée au dysfonctionnement mitochondrial et à l'exécution de l'apoptose.
• La protéine se localise sur la membrane externe mitochondriale via un domaine transmembranaire C-terminal, et son activité est modulée par phosphorylation.
• BNIP3 est impliquée dans les interactions hôte-virus, neutralisant les facteurs anti-apoptotiques viraux tels que l'adénovirus E1B 19K, et fait partie du protéome de référence avec un poids moléculaire calculé d'environ 21,5 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, l'anticorps détecte une bande d'environ 22 kDa dans des conditions réductrices ; préférez un gel SDS-PAGE 12–15 % pour une résolution optimale.
• Validez la réactivité sur des lignées cellulaires ou des lysats tissulaires humains, de souris ou de rat ; incluez des contrôles positifs (par ex. cellules traitées par des inducteurs d'hypoxie ou d'apoptose) et négatifs appropriés.
• Pour IHC-P, réalisez une récupération d'antigène (par ex. tampon citrate, pH 6,0) et titrez l'anticorps primaire pour minimiser le bruit de fond ; validez sur des coupes de tissus pertinents (par ex. cœur, muscle squelettique ou biopsies tumorales).
• En ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection après avoir confirmé son affinité de liaison contre la BNIP3 recombinante ou native.
• BNIP3 étant une protéine membranaire, utilisez des tampons de lyse doux (par ex. RIPA avec inhibiteurs de protéases) et évitez de bouillir excessivement les échantillons pour prévenir l'agrégation.

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