Anticorps Polyclonal Anti-Bmi1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P35226

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Bmi1

• La protéine du complexe Polycomb BMI-1 (également connue sous le nom de PCGF4, RNF51) est un composant central du complexe répressif Polycomb 1 (PRC1), qui maintient la répression transcriptionnelle des gènes clés du développement, y compris les clusters Hox, par le remodelage de la chromatine et les modifications des histones.
• Au sein du complexe PRC1, BMI-1 collabore avec RNF2/RING2 pour catalyser la mono-ubiquitination de l'histone H2A à la Lys-119 (H2AK119ub), une marque épigénétique critique pour le silenciage stable des gènes. Références connexes : PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• Le complexe ternaire RNF2-UB2D3-BMI1 se lie spécifiquement aux nucléosomes et exerce son activité de ligase E3 ubiquitine uniquement sur l'histone H2A nucléosomal, soulignant sa fonction ciblée sur la chromatine. Références connexes : PMID:21772249, PMID:25355358
• BMI-1 agit comme un régulateur positif de l'activité de ligase ubiquitine de RNF2, améliorant ainsi l'ubiquitination de H2A médiée par PRC1 et renforçant la répression transcriptionnelle médiée par Polycomb. Références connexes : PMID:21772249, PMID:26151332
• La localisation subcellulaire est principalement nucléaire, cohérente avec son rôle dans la régulation de la chromatine, bien qu'une distribution cytoplasmique ait également été observée dans certaines conditions (UniProt : LOCALISATION SUBCELLULAIRE).
• BMI-1 est classé comme un proto-oncogène et un régulateur de la chromatine, possédant un domaine de type doigt RING qui coordonne les ions zinc essentiels pour son intégrité structurelle et sa fonction (UniProt : MOTS-CLÉS).

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 120-326 du BMI-1 humain, une région centrale qui peut produire des anticorps reconnaissant plusieurs conformations ou états d'interaction ; validez la spécificité dans le système d'échantillonnage pertinent.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 37 kDa ; envisagez d'utiliser un contrôle de charge de taille similaire et optimisez les conditions de lyse pour préserver l'intégrité des protéines.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, les protocoles de fixation et de perméabilisation peuvent impacter l'accessibilité de l'antigène ; tester différentes méthodes (par exemple, méthanol vs formaldéhyde) peut améliorer la coloration nucléaire.
• La performance ELISA peut être vérifiée en utilisant l'immunogène recombinant comme contrôle positif ; incluez des contrôles négatifs appropriés pour évaluer la liaison de fond.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée lors de la transition entre les lots, et une ré-optimisation des facteurs de dilution peut être nécessaire.

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