Anticorps monoclonal de lapin anti-BiP/GRP78 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P11021

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BiP/GRP78

• BiP/GRP78, également connue sous le nom de protéine régulée par le glucose de 78 kDa (GRP-78), protéine de liaison aux immunoglobulines (BiP) et membre 5 de la famille A des protéines de choc thermique (HSPA5), est un membre de la famille des chaperonnes HSP70 codé par le gène HSPA5. Elle est principalement localisée dans la lumière du réticulum endoplasmique (RE), mais peut également être trouvée dans les mélanosomes, le cytoplasme et à la surface cellulaire sous certaines conditions.
• BiP joue un rôle central dans le repliement des protéines du RE et le contrôle qualité en facilitant le repliement correct des protéines et en ciblant les protéines mal repliées de manière terminale pour leur dégradation. Cette fonction implique une interaction avec des cofacteurs tels que DNAJC10/ERdj5. Références associées : PMID:2294010, PMID:23769672, PMID:23990668
• En tant que régulateur principal de la réponse aux protéines mal repliées (UPR), BiP se lie aux capteurs de stress du RE EIF2AK3/PERK et ERN1/IRE1 et les inactive dans des conditions sans stress. L'accumulation de protéines mal repliées provoque la libération de BiP, déclenchant l'activation de l'UPR et la signalisation en aval. Références associées : PMID:11907036, PMID:1550958, PMID:19538957
• BiP a été impliquée dans la translocation post-traductionnelle de petites protéines pré-sécrétoires à travers la membrane du RE, possiblement en modulant le translocon SEC61. Elle peut également contribuer à l'apoptose et à la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:26045166
• BiP peut agir comme un récepteur pour plusieurs virus, notamment le virus de la dengue, le virus Zika et le virus de l'encéphalite japonaise, facilitant leur fixation et leur entrée dans les cellules hôtes. De plus, elle sert de récepteur pour les protéines CotH des champignons mucorales, jouant un rôle dans l'invasion épithéliale lors de la mucormycose. Références associées : PMID:15098107, PMID:28053106, PMID:33432092, PMID:20484814, PMID:24355926, PMID:32487760
• BiP contient des domaines conservés d'ATPase HSP70 et de liaison au substrat et est soumise à diverses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation, la nitration et l'ubiquitination.
• Le poids moléculaire calculé de BiP/GRP78 est d'environ 72,3 kDa, tel que déterminé à partir de sa séquence d'acides aminés (UniProt : 72333 Da).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 531-630 de la protéine BiP/GRP78 humaine (NP_005338.1), une région conservée chez l'humain, la souris, le rat et le porc, ce qui peut contribuer à la large réactivité croisée de l'anticorps.
• Pour l'analyse par western blot, une bande spécifique à environ 72 kDa est attendue ; validez la spécificité en utilisant des contrôles positifs et négatifs appropriés, et envisagez des expériences de blocage d'antigène.
• L'adéquation de l'anticorps pour l'IF/ICC et l'IHC-P indique un potentiel pour des études de localisation cellulaire ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour les protéines résidant dans le RE.
• Étant donné la présence de BiP dans de multiples compartiments subcellulaires (RE, mélanosome, cytoplasme, surface cellulaire), une co-coloration avec des marqueurs spécifiques aux organites ou un fractionnement subcellulaire peut être bénéfique pour une localisation définitive.

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