Anticorps polyclonal Anti-bêta 2 Microglobuline pour WB, IHC-P, ELISA - P61769

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la bêta 2 microglobuline

• La bêta-2-microglobuline (B2M) est la chaîne légère du complexe majeur d'histocompatibilité de classe I (CMH I), essentielle pour présenter les antigènes peptidiques aux lymphocytes T CD8+, jouant ainsi un rôle crucial dans l'immunité adaptative.
• C'est une protéine sécrétée également présente à la surface cellulaire, associée de manière non covalente à la chaîne lourde du CMH I ; son repliement et son assemblage sont essentiels pour une expression stable du CMH I.
• La protéine exogène EsxA de Mycobacterium tuberculosis se lie à la B2M et réduit son exportation à la surface cellulaire, pouvant altérer la présentation de l'antigène de classe I (PubMed:25356553).
  Références associées : PMID:25356553
• Structurellement, la B2M contient un domaine de type immunoglobuline et est stabilisée par une liaison disulfure intramoléculaire (Cys25-Cys80). C'est une glycoprotéine qui subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycation et la formation de pyroglutamate en N-terminal.
• Les mutations de la B2M sont associées à l'hypoprotéinémie hypercatabolique familiale et à l'amylose, où elle peut former des dépôts fibrillaires dans les tissus, notamment dans l'amylose liée à la dialyse.
• Malgré sa petite taille (~13,7 kDa théorique), la bêta-2-microglobuline migre à environ 14 kDa sur SDS-PAGE dans des conditions réductrices.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la forme sécrétée mature (acides aminés 21-119), excluant le peptide signal ; l'anticorps peut reconnaître la B2M réduite et non réduite, mais pour des résultats cohérents, validez dans des conditions dénaturantes et réductrices (par exemple, chauffage à 95°C avec du DTT) pour rompre les liaisons disulfures.
• Pour le Western blot, chargez 10 à 30 µg de lysat cellulaire total ou de sérum concentré, et utilisez un contrôle positif tel qu'un tissu riche en lymphocytes (rate, ganglion lymphatique) ou des lignées cellulaires exprimant le CMH I.
• En immunohistochimie sur coupes fixées au formol et incluses en paraffine (IHC-P), effectuez une récupération antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) ou un tampon EDTA (pH 9,0) et envisagez une expérience de titration pour optimiser l'intensité de la coloration.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la B2M de souris et de rat, le rendant adapté aux modèles rongeurs ; vérifiez l'homologie de séquence et testez les lysats de tissus pertinents pour confirmer la réactivité inter-espèces.
• Pour l'ELISA, il peut être utilisé comme anticorps de capture ou de détection ; l'appariement avec un autre clone reconnaissant un épitope différent peut améliorer la sensibilité dans les tests sandwich. Optimisez les tampons de revêtement et les facteurs de dilution.
• En raison de la sécrétion de la B2M, des échantillons sans cellules peuvent être analysés ; pour les cibles de faible abondance, un enrichissement par immunoprécipitation ou une concentration peuvent être nécessaires.

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