Anticorps monoclonal de lapin anti-Bécline 1 (Validé KO) pour WB et ELISA - Q14457

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Bécline 1

• La Bécline-1 joue un rôle central dans l'autophagie en tant que sous-unité centrale du complexe de la phosphatidylinositol 3-kinase de classe III (PI3K), médiant la formation du phosphatidylinositol 3-phosphate ; différentes formes de complexe (PI3KC3-C1 et PI3KC3-C2) dirigent respectivement l'initiation et la maturation de l'autophagosome (PubMed:18570871, PubMed:21358617, PubMed:23184933).
  Références associées : PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933

• Elle est également impliquée dans le trafic endocytique dégradatif, l'endocytose et l'étape d'abscission de la cytokinèse, probablement dans le contexte du complexe PI3KC3-C2 (PubMed:20208530, PubMed:20643123, PubMed:23974797, PubMed:25275521).
  Références associées : PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797 PMID:25275521

• La Bécline-1 se localise largement dans le cytoplasme, l'appareil de Golgi, la membrane du réseau trans-Golgien, la membrane de l'endosome, la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane mitochondriale, les autophagosomes et le noyau, ce qui est cohérent avec ses diverses fonctions de trafic et de signalisation.

• Un fragment C-terminal de 35 kDa (Bécline-1-C) se localise spécifiquement aux mitochondries, où il peut favoriser l'apoptose en induisant la translocation de BAX et la libération de facteurs pro-apoptotiques.

• Elle contribue à la défense antivirale de l'hôte ; par exemple, elle protège contre l'infection par une souche neurovirulente du virus Sindbis.

• L'expression de la Bécline-1 est ubiquitaire, soulignant son rôle fondamental dans l'homéostasie cellulaire.

• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination (comme indiqué par les mots-clés : Phosphoprotéine, Acétylation, Conjugaison Ubl, Liaison isopeptidique), modulant son activité dans l'autophagie et l'apoptose.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les 280 acides aminés N-terminaux, englobant des domaines fonctionnels critiques ; cette conception peut permettre la détection à la fois de la Bécline-1 pleine longueur (~52 kDa) et de l'isoforme mitochondriale de 35 kDa dans certains contextes.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de cellules humaines, murines ou de rat. Bien que le poids moléculaire prédit soit de 52 kDa, la bande peut apparaître près de 60 kDa en raison de modifications post-traductionnelles ; validez avec des contrôles knockout lorsque disponibles.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour un ELISA direct ou de capture ; les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement avec la matrice d'échantillon pertinente.
• Étant donné que l'expression de la Bécline-1 peut être induite par des stimuli autophagiques, l'inclusion de contrôles positifs (par exemple, des cellules traitées par privation ou rapamycine) peut aider à la validation du test.

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