Anticorps Monoclonaux Anti-BCL6 () pour Cytométrie en Flux Intracellulaire - P41182

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du BCL6

• BCL6 (B-cell lymphoma 6) est un répresseur transcriptionnel critique pour la formation du centre germinatif et la maturation de l'affinité des anticorps, codé par le gène BCL6 (GeneID : 604) avec plusieurs isoformes générées par épissage alternatif.
li>Il se lie à la séquence consensus de l'ADN 5'-TTCCTAGAA-3' et recrute des complexes corépresseurs, y compris des histones désacétylases, pour silencer les gènes cibles impliqués dans la différenciation, l'apoptose et le contrôle du cycle cellulaire dans les cellules B du centre germinatif (GC).
• BCL6 autorégule sa propre expression et régule positivement AICDA indirectement en réprimant les microARN tels que miR-155, favorisant ainsi la recombinaison de commutation de classe des immunoglobulines et l'hypermutation somatique tout en supprimant l'apoptose dépendante de p53.
• Dans les cellules T folliculaires auxiliaires (TFH), BCL6 pilote le programme génique TFH et inhibe la différenciation vers les lignées TH1, TH2 et TH17, et est essentiel pour la mémoire immunologique à la fois dans les cellules B et T.
• Il réprime également la prolifération des macrophages en compétition avec STAT5 pour les motifs de liaison sur les gènes cibles comme CCL2 et CCND2, et médie l'arrêt du cycle cellulaire dans les cellules B du GC sous stress génotoxique via des voies dépendantes et indépendantes de p53.
• Au-delà de l'immunité, BCL6 contrôle la neurogenèse en modifiant la transcription dépendante de NOTCH sur des cibles comme HES5, recrutant la désacétylase SIRT1 pour induire un silence épigénétique et la différenciation neuronale.
• Au niveau subcellulaire, BCL6 se localise exclusivement dans le noyau, cohérent avec son rôle de facteur de transcription liant l'ADN.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'acétylation, et la protéine présente un domaine BTB/POZ N-terminal et des doigts de zinc C-terminaux, la classant comme répresseur transcriptionnel à doigts de zinc.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 235–350 (région centrale en dehors du domaine BTB), ce qui peut produire un anticorps reconnaissant les deux isoformes majeurs (72 kDa et 78 kDa) ; validez la spécificité dans votre type cellulaire cible.
• Comme cet anticorps est conjugué directement à l'ABflo® 488, il convient à la cytométrie en flux intracellulaire ; optimisez les étapes de fixation et de perméabilisation pour votre cible nucléaire afin d'assurer une accessibilité adéquate de l'épitope.
• Puisque BCL6 est exprimé de manière transitoire lors de la différenciation des cellules B du GC, envisagez d'utiliser des stratégies de gating appropriées et des co-marquages avec des marqueurs (ex : CD38, CD20) pour identifier les cellules B du GC ou les cellules TFH dans les échantillons humains.
• Confirmez la réactivité croisée avec vos échantillons, car la réactivité documentée est limitée à l'humain ; effectuez une validation supplémentaire si vous travaillez avec des primates non humains ou d'autres espèces.

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