Anticorps Polyclonal Anti-Bcl-2 pour WB, IP, ELISA - P49950

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du Bcl-2

• Bcl-2, codé par le gène Bcl2, est une protéine anti-apoptotique clé qui supprime la mort cellulaire programmée dans divers systèmes cellulaires, y compris les cellules lymphohématopoïétiques dépendantes de facteurs et les cellules neurales.
• Il régule la mort cellulaire en contrôlant la perméabilité de la membrane mitochondriale, fonctionnant en boucle de rétroaction avec les caspases. Il inhibe l'activité des caspases soit en empêchant la libération du cytochrome c par les mitochondries, soit en se liant au facteur d'activation de l'apoptose APAF-1.
• Au-delà de l'apoptose, Bcl-2 agit comme un inhibiteur de l'autophagie : il interagit avec BECN1 et AMBRA1 dans des conditions de non-jeûne pour supprimer la fonction d'autophagie.
• Il peut également atténuer l'inflammation en entravant l'activation de l'inflammasome NLRP1, réduisant ainsi l'activation de CASP1 et la libération d'IL1B.
• Au niveau subcellulaire, Bcl-2 se localise à la membrane externe des mitochondries, à la membrane nucléaire, à la membrane du réticulum endoplasmique et dans le cytoplasme.
• L'expression tissulaire est large, avec les niveaux les plus élevés dans les tissus reproducteurs. Dans le cerveau adulte, on le trouve dans les cellules mitrales du bulbe olfactif, les neurones granulaires et pyramidaux de l'hippocampe, les noyaux pontiques, les neurones granulaires du cervelet et les cellules épendymaires ; l'expression prénatale dans le cerveau est plus élevée dans le neuroépithélium et la plaque corticale.
• La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 26,6 kDa et fait l'objet de modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et l'ubiquitination (conjugaison Ubl).

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène comprend un peptide synthétique correspondant aux résidus 1–100 du Bcl-2 de rat, suggérant que l'anticorps reconnaît la région N-terminale. Cette région peut être conservée entre les espèces ; la réactivité croisée avec la souris est confirmée, mais des tests dans d'autres espèces doivent être validés.

Pour le Western blot (WB), chargez des lysats de témoins positifs appropriés (par exemple, issus de tissus ou cellules de rat ou de souris exprimant Bcl-2) et attendez une bande à ~26 kDa. Des conditions réductrices sont généralement utilisées, mais une optimisation peut être nécessaire.

Pour l'immunoprécipitation (IP), titrez la quantité d'anticorps et incluez des contrôles d'isotype pertinents. Le pré-nettoyage des lysats peut réduire la liaison non spécifique.

Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; validez le couplage avec un anticorps secondaire approprié pour votre format de test.

Incluez toujours des témoins négatifs appropriés pour évaluer la spécificité, et envisagez de tester dans le système endogène d'intérêt.

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