Anticorps polyclonal anti-BCKDK pour WB, IF/ICC, ELISA - O14874

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BCKDK

• BCKDK est une sérine/thréonine protéine kinase qui agit comme un régulateur métabolique clé, formant une paire fonctionnelle avec la phosphatase PPM1K pour coordonner le catabolisme des acides aminés à chaîne ramifiée (BCAA) avec le métabolisme du glucose et des lipides. Références associées : PMID:24449431 PMID:29779826 PMID:37558654
• Elle phosphoryle et inactive le complexe mitochondrial de l'alpha-cétoacide déshydrogénase à chaîne ramifiée (BCKDH) en ciblant la sous-unité BCKDHA au niveau du Ser-337, interrompant ainsi l'acheminement des substrats et régulant négativement la dégradation des BCAA.
• De plus, BCKDK phosphoryle l'ATP-citrate lyase cytosolique (ACLY) au niveau du Ser-455 en réponse à l'abondance de glucides, favorisant la lipogenèse et la gluconéogenèse pendant la transition du jeûne à l'alimentation. Références associées : PMID:29779826
• La protéine est localisée dans la matrice mitochondriale.
• BCKDK est exprimée de manière ubiquitaire dans tous les tissus humains.
• Les annotations UniProt associent BCKDK aux troubles du spectre autistique, à l'épilepsie et au handicap intellectuel.
• La kinase reconnaît un motif de site de phosphorylation SxxE/D spécifique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène (acides aminés 153-412) se situe dans le domaine kinase ; prévoyez un alignement de séquence pour prédire la réactivité croisée entre les espèces et les isoformes.
• Pour le WB, une bande proche de la taille prédite de 46 kDa est attendue ; incluez systématiquement des contrôles positifs (par exemple, lysats de tissus humains/rat) et négatifs pour confirmer la spécificité.
• En IF/ICC, un motif de coloration mitochondriale peut être observé ; une co-coloration avec des marqueurs d'organites est recommandée pour la validation.
• Pour l'ELISA, déterminez par titrage les concentrations optimales d'antigène de revêtement et d'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.

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