Anticorps polyclonal de lapin anti-Bax (validé par KO) pour la recherche sur l'apoptose - Q07812

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Bax

• Bax est un régulateur central de l'apoptose qui induit la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale. En réponse à un stress cellulaire, il subit un changement conformationnel, se translocate vers la membrane externe mitochondriale et déclenche la libération du cytochrome c, ce qui active la caspase-3 et l'apoptose en aval. Références associées : PMID:10772918 PMID:11060313 PMID:16113678
• Dans des conditions normales, Bax est maintenu dans un état inactif majoritairement dans le cytosol grâce à une rétrotranslocation constante depuis les mitochondries vers le cytosol, médiée par BCL2L1/Bcl-xL, ce qui empêche son accumulation mitochondriale toxique. Références associées : PMID:21458670
• Bax est exprimée dans une grande variété de tissus. Plusieurs isoformes sont générées par épissage alternatif : l'isoforme Psi est retrouvée dans les tumeurs gliales ; l'isoforme Alpha est exprimée dans la rate, le sein, l'ovaire, le testicule, le côlon et le cerveau, avec des niveaux faibles dans la peau et le poumon ; l'isoforme Sigma présente une distribution tissulaire similaire et est également présente dans de nombreuses lignées cellulaires cancéreuses.
• Au niveau sous-cellulaire, Bax se localise sur la membrane externe des mitochondries, dans le cytoplasme et dans le noyau, sa distribution changeant en réponse aux signaux apoptotiques.
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation, la conjugaison Ubl et la formation de liaisons isopeptidiques peuvent moduler l'activité et la stabilité de Bax.
• Bax est classée comme suppresseur de tumeur et est impliquée dans les interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1–100) de la Bax humaine, qui est très conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui contribue probablement à la réactivité croisée observée. Lors de la validation dans votre système modèle, confirmez la spécificité via des contrôles par extinction ou knockout.
• Pour le western blot (WB), attendez une bande à ~21 kDa. Utilisez des conditions réductrices et des contrôles de charge appropriés ; sachez que plusieurs isoformes peuvent produire des bandes supplémentaires.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), les méthodes de récupération d'antigène et de fixation peuvent influencer la détection des pools de Bax cytosoliques par rapport aux pools mitochondriaux. Il est conseillé de réaliser des expériences pilotes pour optimiser les conditions.
• Cet anticorps polyclonal peut convenir pour l'immunoprécipitation (IP) et l'ELISA. Pour l'ELISA, l'immunogène peptidique peut servir d'étalon pour la quantification.

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