Anticorps polyclonal de lapin anti-Bak pour WB, ELISA - Q16611

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Bak

• Bak (antagoniste/tueur homologue à Bcl-2), également connu sous le nom de régulateur de l'apoptose BAK ou Bcl2-L-7, est un membre pro-apoptotique de la famille des protéines Bcl-2.
• Codé par le gène BAK1 (ID de gène : 578), il joue un rôle critique dans la voie mitochondriale intrinsèque de l'apoptose.
• Lors de stimuli apoptotiques, Bak s'oligomérise et forme des pores dans la membrane externe des mitochondries (MOM), entraînant sa perméabilisation et la libération de facteurs apoptogènes tels que le cytochrome c dans le cytosol.
• Cette libération déclenche l'activation de la caspase 9 et des caspases effectrices en aval, exécutant le programme de mort cellulaire.
• Bak est principalement localisé dans la membrane externe des mitochondries, ce qui est cohérent avec sa fonction de régulation de l'apoptose.
• Il est largement exprimé dans les tissus humains, avec les niveaux d'expression les plus élevés dans le cœur et le muscle squelettique.
• Des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la liaison au zinc, peuvent réguler l'activité de Bak, et l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• La protéine interagit avec des facteurs de l'hôte lors de l'infection virale, soulignant son rôle dans les interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été élevé contre un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 1–100 de la région N-terminale de Bak humain ; il est censé reconnaître la protéine endogène Bak de pleine longueur.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 23 kDa ; envisagez d'utiliser des fractions enrichies en mitochondries ou des lysats de contrôle positifs provenant du cœur ou du muscle squelettique où l'expression de Bak est la plus élevée.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, titrez l'anticorps pour déterminer les concentrations optimales de revêtement et de détection, et validez la spécificité en utilisant la protéine Bak recombinante ou des tests de compétition peptidique.
• Une réactivité croisée avec la souris est rapportée ; cependant, validez dans votre système d'échantillon spécifique, car la détection peut varier en fonction de la préparation de l'échantillon et de l'accessibilité de l'épitope.
• Puisque Bak est une protéine membranaire mitochondriale, assurez-vous d'utiliser des tampons de lyse et des conditions de dénaturation appropriés pour exposer l'épitope.

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