Anticorps polyclonal Anti-B-Raf V600E pour WB et ELISA - P15056

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de B-Raf

• B-Raf est une serine/thréonine-protéine kinase qui agit comme transducteur clé de la voie de signalisation mitogène RAS-RAF-MEK-ERK en phosphorylant MAP2K1/MEK1 (PubMed:21441910, PubMed:29433126).
  Références associées :
  PMID:21441910, PMID:29433126
• Il phosphoryle également PFKFB2, intégrant ainsi la signalisation par les facteurs de croissance au métabolisme glucidique cellulaire (PubMed:36402789).
  Références associées :
  PMID:36402789
• B-Raf pourrait contribuer à la plasticité synaptique, comme l'indique son rôle dans les réponses post-synaptiques des neurones hippocampiques (PubMed:1508179).
  Références associées :
  PMID:1508179
• La mutation V600E (substitution d'une valine par un glutamate à la position 600) dans le domaine kinase conduit à une activité kinase constitutive et constitue un moteur fréquent du mélanome, des cancers colorectaux et des cancers de la thyroïde.
• B-Raf se localise dans le noyau, le cytoplasme et la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle de transmission des signaux extracellulaires aux effecteurs intracellulaires.
• La protéine est exprimée majoritairement dans le cerveau et les testicules, et est soumise à des modifications régulatrices incluant l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 507–606, qui inclut le site de mutation V600E ; cette conception peut conférer une spécificité pour le mutant par rapport à B-Raf de type sauvage.
• Pour le Western blotting, utilisez un gel SDS-PAGE standard optimisé pour une protéine d'environ 84 kDa et validez la détection avec des lysats de cellules exprimant soit B-Raf de type sauvage, soit B-Raf V600E.
• En ELISA, envisagez d'inclure le peptide d'immunisation comme contrôle positif pour confirmer la spécificité de liaison.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; nous recommandons de confirmer les performances de chaque nouveau lot dans votre système d'essai spécifique.

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