Anticorps polyclonal de lapin anti-AUH pour WB, ELISA - Q13825

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AUH

• AUH code pour la méthylglutaconyl-CoA hydratase, une enzyme mitochondriale également connue sous le nom d'enoyl-CoA hydratase à liaison ARN spécifique AU. Elle joue un double rôle dans le catabolisme de la leucine et le métabolisme de l'ARN.
• Catalyse l'hydratation du 3-méthylglutaconyl-CoA en 3-hydroxy-3-méthylglutaryl-CoA (HMG-CoA) dans la voie de dégradation de la leucine, une étape clé pour la production de corps cétoniques (PubMed:11738050, 12434311, 12655555, 16640564).
  Références associées :
  PMID:11738050 PMID:12434311 PMID:12655555 PMID:16640564
• Présente une spécificité de substrat plus large in vitro, incluant le glutaconyl-CoA, le crotonyl-CoA et le 3-méthylcrotonyl-CoA, bien qu'avec une affinité plus faible (PubMed:16640564).
  Références associées :
  PMID:16640564
• Se lie aux éléments riches en AU (ARE) au niveau des ARNm, suggérant un rôle dans la régulation de la stabilité et de la dégradation des ARNm (PubMed:7892223).
  Références associées :
  PMID:7892223
• Pourrait fonctionner comme itaconyl-CoA hydratase dans la voie du catabolisme des C5-dicarboxylates, détoxifiant l'itaconate, un métabolite antimicrobien produit par les macrophages (PubMed:29056341).
  Références associées :
  PMID:29056341
• Se localise principalement dans la matrice mitochondriale, ce qui est cohérent avec ses fonctions métaboliques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, et la protéine subit un épissage alternatif, ce qui ajoute de la diversité fonctionnelle.
• Les variants génétiques d'AUH sont associés à des maladies, ce qui souligne son importance clinique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé correspond aux acides aminés 68–339 de l'AUH humain, couvrant une grande partie de la protéine mature. Cela peut favoriser la reconnaissance des conformations natives et dénaturées dans diverses applications.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 36 kDa (ou 35,6 kDa selon UniProt) est attendue. Utilisez des lysats enrichis en mitochondries ou des lignées cellulaires avec une expression d'AUH confirmée comme témoins positifs pour vérifier la spécificité de la bande.
• En ELISA, un revêtement direct avec la protéine AUH recombinante ou le fragment d'immunogène peut être utilisé comme stratégie de capture. Envisagez d'associer cet anticorps avec un anticorps de détection reconnaissant un épitope distinct pour le développement d'un ELISA sandwich.
• Pour confirmer la spécificité de la cible, il est recommandé d'effectuer une extinction par ARNsi ou un knockout par CRISPR d'AUH dans les lignées cellulaires pertinentes pour observer la perte de signal en WB.
• Compte tenu de la forte homologie de séquence entre l'AUH humain, de souris et de rat, l'anticorps peut présenter une réaction croisée avec ces espèces. Validez toujours la réactivité sur des échantillons provenant de l'espèce appropriée si vous travaillez sur des systèmes non humains.

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