Anticorps polyclonal de lapin anti-ATP7A pour WB et ELISA - Q04656

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP7A

• L'ATP7A, également connue sous le nom de pompe à cuivre 1 ou protéine associée à la maladie de Menkes, est une ATPase de transport du cuivre 1 codée par le gène ATP7A chez l'homme.
• Elle fonctionne comme une pompe à cuivre (Cu⁺) dépendante de l'ATP, cruciale pour l'homéostasie intracellulaire des ions cuivre, acquérant du Cu⁺ à partir de donneurs cytoplasmiques et le délivrant à travers les membranes. Références connexes : PMID:10419525 PMID:11092760 PMID:28389643
• Le cycle catalytique couple l'hydrolyse de l'ATP à la translocation du cuivre, impliquant une phosphorylation transitoire et un changement conformationnel de l'état orienté vers l'intérieur vers l'état orienté vers l'extérieur. Références connexes : PMID:10419525 PMID:19453293 PMID:19917612
• Sous de faibles concentrations de cuivre cytosolique, l'ATP7A se localise dans le réseau trans-Golgi pour fournir du Cu⁺ aux cuproenzymes de la voie sécrétoire ; lors de l'augmentation du cuivre, elle se relocalise vers la membrane plasmique pour exporter l'excès de cuivre. Références connexes : PMID:11092760 PMID:28389643 PMID:10419525
• Dans les neurones, l'ATP7A régule l'efflux de cuivre et la transmission synaptique, et fournit du Cu⁺ à des enzymes telles que PAM, TYR et SOD3, jouant un double rôle dans la fonction et la survie neuronales. Références connexes : PMID:28389643
• Dans les mélanosomes, elle fournit le cofacteur cuivre à la tyrosinase (TYR) pour la biosynthèse de la mélanine.
• L'ATP7A est largement exprimée, notamment dans le cœur, le cerveau, le poumon, le muscle, le rein et le pancréas, et à des niveaux plus faibles dans le placenta ; elle est également présente dans les fibroblastes et les cellules endothéliales vasculaires.
• La protéine subit un épissage alternatif et est sujette à des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et la glycosylation, avec des rôles dans divers compartiments cellulaires, notamment l'appareil de Golgi, la membrane, les endosomes et les synapses.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps est généré contre une protéine de fusion recombinante correspondant à la région N-terminale (acides aminés 1-79) de l'ATP7A humaine. Envisagez de vérifier la spécificité par analyse Western blot en utilisant des lignées cellulaires ou des lysats tissulaires connus pour exprimer l'ATP7A.
• Pour le Western blot (WB), l'ATP7A est prédite pour migrer à environ 163 kDa ; cependant, les spécifications du produit notent une large plage de 11-172 kDa, reflétant possiblement des isoformes ou des produits de dégradation. Optimisez en conséquence le pourcentage de gel et les conditions de transfert, et incluez des inhibiteurs de protéases appropriés.
• Une réactivité croisée avec l'ATP7A de rat a été rapportée ; validez les performances sur des échantillons de rat si une détection inter-espèces est souhaitée.
• Pour les applications ELISA, envisagez de tester une gamme de dilutions d'anticorps et d'employer des témoins positifs et négatifs appropriés.
• Puisque l'ATP7A est une protéine transmembranaire, le choix du tampon de lyse (par exemple, RIPA) et la préparation des échantillons (avec ou sans chauffage) peuvent influencer la détection. Déterminez empiriquement les conditions optimales.

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