Anticorps polyclonal anti-ATP6V1E1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P36543

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATP6V1E1

• ATP6V1E1 code pour la sous-unité E1 de l'ATPase protonique de type V, également connue sous le nom de sous-unité V-ATPase 31 kDa (p31), sous-unité E1 de la pompe à protons vacuolaire, et ATP6E/ATP6E2. L'épissage alternatif peut générer de multiples isoformes.
• En tant que sous-unité du complexe périphérique V1 de la V-ATPase, elle participe à l'hydrolyse de l'ATP pour entraîner la translocation de protons à travers les membranes, acidifiant ainsi les compartiments intracellulaires tels que les lysosomes, les endosomes et les vésicules sécrétrices (PubMed:32001091, PubMed:33065002). Références associées : PMID:32001091 PMID:33065002
• La V-ATPase se localise également à la membrane plasmique dans certains types cellulaires, contribuant à l'acidification extracellulaire et à la régulation du pH (PubMed:32001091). Références associées : PMID:32001091
• Le complexe V-ATPase agit comme un activateur de mTORC1 sur les membranes lysosomales en facilitant l'activité de facteur d'échange de nucléotides guanine (GEF) du complexe Ragulator, favorisant ainsi le recrutement de mTORC1 et la signalisation anabolique (PubMed:22053050, PubMed:39695235). Références associées : PMID:22053050 PMID:39695235
• Au niveau subcellulaire, ATP6V1E1 se trouve sur la membrane cellulaire apicale, les membranes des vésicules cytoplasmiques (vésicules synaptiques, vésicules recouvertes de clathrine) et la membrane lysosomale.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux élevés dans le rein (en particulier le néphron distal), la peau, et une détection généralisée dans tous les tissus (PubMed:29993276, PubMed:12036578, PubMed:28065471). Références associées : PMID:29993276 PMID:12036578 PMID:28065471
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, comme indiqué par des études protéomiques, qui pourraient réguler son assemblage ou son activité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 77-226 de l'ATP6V1E1 humain, une région bien conservée entre les espèces, ce qui soutient la réactivité croisée observée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 26 kDa est attendue. Utilisez des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de tissus de HeLa ou de rein, et envisagez d'inclure un contrôle négatif.
• En immunofluorescence/ICC, l'anticorps devrait reconnaître la V-ATPase dans les structures vésiculaires et éventuellement à la membrane plasmique. L'optimisation des conditions de perméabilisation et de fixation est recommandée pour chaque type cellulaire.
• Les applications ELISA peuvent utiliser l'immunogène recombinant ou des fragments peptidiques comme antigènes de revêtement ; une pré-validation de l'anticorps dans le format de test choisi est conseillée.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il peut détecter de multiples isoformes résultant d'un épissage alternatif ; cette propriété peut être avantageuse pour détecter les niveaux totaux d'ATP6V1E1.
• Bien que la réactivité croisée avec la souris et le rat soit indiquée par le fournisseur, une validation individuelle dans votre système d'échantillonnage spécifique est recommandée en raison des variations potentielles d'accessibilité de l'antigène spécifiques à l'espèce.

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