Anticorps polyclonal de lapin anti-ATP6V0D1 pour WB, ELISA - P61421

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP6V0D1

• ATP6V0D1 code pour la sous-unité d1 du domaine V0 de la H+-ATPase vacuolaire (V-ATPase), également appelée protéine accessoire de 32 kDa, p39, sous-unité AC39 de la V-ATPase, ou sous-unité d1 de la pompe à protons vacuolaire.
• La V-ATPase est une enzyme multi-sous-unités responsable de l'acidification des compartiments intracellulaires tels que les lysosomes et les endosomes, et dans certains types cellulaires, elle se localise à la membrane plasmique pour acidifier l'environnement extracellulaire. Références associées : PMID:30374053
• Le complexe V-ATPase agit comme un activateur de mTORC1 sur les membranes lysosomales en favorisant l'activité de facteur d'échange de nucléotides guanine (GEF) du complexe Ragulator, permettant le recrutement de mTORC1. Références associées : PMID:22053050
• Dans des conditions aérobies, ATP6V0D1 participe à l'homéostasie du fer intracellulaire en déclenchant l'activité de la prolyl hydroxylase Fe(2+) (PHD), ce qui conduit à l'hydroxylation de HIF1A et à sa dégradation subséquente par le protéasome. Références associées : PMID:28296633
• La protéine pourrait également contribuer à la biogenèse des cils via la régulation du transport des protéines et leur localisation au cil.
• Au niveau subcellulaire, ATP6V0D1 est associée aux membranes, y compris la membrane lysosomale et la membrane des vésicules recouvertes de clathrine.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus.
• La protéine est classée comme phosphoprotéine et figure dans l'identification protéomique ; elle fait partie du protéome de référence.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à l'ATP6V0D1 humain pleine longueur (acides aminés 1–351), ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître la protéine native. Pour le Western blot, attendez-vous à une bande proche de 40 kDa ; validez sur des lysats humains, de souris ou de rat.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser une protéine ATP6V0D1 recombinante ou des lysats cellulaires comme antigène de coating et optimisez expérimentalement la dilution de l'anticorps.
• Étant donné l'expression ubiquitaire de la V-ATPase, les niveaux endogènes peuvent servir de contrôle interne, mais notez les variations potentielles selon les tissus et types cellulaires.
• Comme la cible contient des domaines transmembranaires, utilisez des méthodes de préparation d'échantillon appropriées pour éviter l'agrégation ; évitez les conditions de dénaturation trop sévères si le signal est faible.

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