Anticorps polyclonal de lapin anti-ATP6V0A1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q93050

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP6V0A1

• ATP6V0A1 code pour la sous-unité a1 de 116 kDa du domaine V0 de la H+-ATPase vacuolaire (V-ATPase), une enzyme multi-sous-unités qui pompe des protons à travers les membranes cellulaires. Références connexes : PMID:33065002, PMID:33833240, PMID:34909687

• Cette sous-unité est essentielle pour le transport des protons dans les organites tels que les lysosomes, les endosomes, le réseau trans-Golgi et les vésicules synaptiques, maintenant un pH luminal acide pour la dégradation des protéines, le trafic des récepteurs et le chargement des neurotransmetteurs.

• La V-ATPase agit comme un activateur de mTORC1 sur les membranes lysosomales en favorisant l'activité du facteur d'échange de nucléotides guanidiques (GEF) du complexe Ragulator, recrutant mTORC1 à la surface du lysosome. Références connexes : PMID:22053050

• Dans les neurones, ATP6V0A1 est critique pour le développement et la connectivité neuronale ; les mutations perte de fonction sont associées à l'encéphalopathie épileptique et développementale et au handicap intellectuel. Références connexes : PMID:33833240

• La protéine se localise à la membrane des vésicules recouvertes de clathrine, des vésicules synaptiques et des mélanosomes, et peut également être exportée vers la membrane plasmique dans des cellules spécialisées pour acidifier l'environnement extracellulaire.

• ATP6V0A1 subit un épissage alternatif et contient de multiples sites de N-glycosylation et de phosphorylation, qui peuvent réguler sa stabilité et sa fonction.

Conseils expérimentaux et techniques

• Parce que l'immunogène correspond à une région cytoplasmique (aa 60-300), cet anticorps polyclonal peut détecter efficacement l'ATP6V0A1 native et dénaturée dans un Western blot (WB). Une bande près de 96 kDa prédite peut être observée ; des bandes supplémentaires dues à des modifications post-traductionnelles ou des isoformes sont possibles.

• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), l'anticorps peut visualiser l'ATP6V0A1 dans les compartiments vésiculaires intracellulaires, tels que les endosomes et les lysosomes. Un marquage conjoint avec des marqueurs d'organites peut confirmer la localisation.

• Pour l'ELISA, la détection directe ou indirecte de fragments de protéine ATP6V0A1 recombinants ou purifiés est possible. Titrez l'anticorps et utilisez des tampons de blocage appropriés pour optimiser le rapport signal/bruit.

• Validez la spécificité de l'anticorps en incluant des lysats de contrôle positif (par exemple, HeLa, U2OS) et un contrôle négatif (cellules knockout ou traitées par siRNA) dans vos expériences.

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