Anticorps monoclonal de lapin anti-ATP6AP1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q15904

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP6AP1

• L'ATP6AP1 (sous-unité S1 de la pompe à protons de type V), également connue sous le nom d'Ac45, XAP-3 ou ATP6S1, est une sous-unité accessoire du complexe V0 de la H+-ATPase vacuolaire (V-ATPase). Cette enzyme multisubunitaires couple l'hydrolyse de l'ATP par le complexe V1 à la translocation de protons par le complexe V0, entraînant l'acidification des compartiments intracellulaires. Références associées : PMID:28296633 PMID:33065002
• Au-delà de l'acidification, le complexe V-ATPase agit comme un activateur lysosomal de mTORC1 en favorisant l'activité de facteur d'échange de nucléotides guanine (GEF) du complexe Ragulator, facilitant ainsi le recrutement de mTORC1. Références associées : PMID:22053050
• L'ATP6AP1 guide la V-ATPase vers des compartiments sous-cellulaires spécialisés, tels que les vésicules sécrétrices neuroendocrines et la bordure en brosse des ostéoclastes, régulant son activité. Elle participe également au trafic membranaire et à la fusion membranaire dépendante du Ca²⁺. Références associées : PMID:27231034
• Dans des conditions aérobies, l'ATP6AP1 contribue à l'homéostasie du fer intracellulaire, ce qui déclenche l'activité des enzymes prolyl hydroxylases dépendantes du Fe²⁺ (PHD), conduisant à l'hydroxylation de HIF1A et à sa dégradation protéasomale ultérieure. Références associées : PMID:28296633
• La protéine se localise à la membrane du réticulum endoplasmique, au compartiment intermédiaire ER-Golgi, et à diverses vésicules cytoplasmiques, y compris les vésicules sécrétrices, synaptiques et recouvertes de clathrine.
• Exprimée de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau et les plus faibles dans le foie et le duodénum, ce qui correspond à ses rôles dans la sécrétion régulée et le trafic intracellulaire.
• Des mutations de l'ATP6AP1 sont associées à des troubles congénitaux de la glycosylation (CDG), soulignant son importance dans le traitement des glycoprotéines.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (peptide N-terminal, aa 1–100) cible une région conservée chez l'homme et la souris, ce qui soutient la réactivité croisée. Validez dans des systèmes d'échantillons pertinents en utilisant des contrôles positifs (par exemple, un lysat de tissu cérébral) où l'expression est élevée.
• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à un bande d'environ 52 kDa. Commencez avec des dilutions d'IgG standard et optimisez de manière empirique. Un contrôle négatif (par exemple, un lysat avec knockdown par siRNA ou knockout) est recommandé pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez des étapes de démasquage antigénique et testez sur des coupes de tissus fixés au formol et inclus en paraffine connus pour exprimer l'ATP6AP1, comme le cerveau ou le pancréas.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; cependant, l'appariement avec un autre clone peut améliorer la sensibilité. Titrez les concentrations d'anticorps pour établir la plage dynamique optimale.

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