Anticorps monoclonal anti-ATP5G1 pour WB, IF-P, ELISA - P05496

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’ATP5G1

• ATP5G1 code la sous-unité C1 du complexe F(0) de l’ATP synthase, également connue sous le nom de protéine de liaison aux lipides de l’ATP synthase ou de locus 1 de la sous-unité membranaire c de l’ATP synthase, un composant essentiel de l’ATP synthase mitochondriale (complexe V).
• Cette sous-unité fait partie intégrante du domaine membranaire F(0), où elle coopère avec la sous-unité a (MT-ATP6) pour former un canal conducteur de protons qui transloque les protons de l’espace intermembranaire vers la matrice mitochondriale, entraînant ainsi la synthèse d’ATP. Références associées : PMID:37244256
• Le domaine F(0) contient deux demi-canaux essentiels (d’entrée et de sortie) qui facilitent le déplacement des protons par un mécanisme de Grotthuss ; la translocation des protons est couplée à la rotation de la tige centrale, reliant le flux de protons à la synthèse d’ATP dans la tête catalytique F(1). Références associées : PMID:37244256
• L’ATP5G1 se localise dans la membrane interne mitochondriale, comme l’indiquent ses hélices transmembranaires et sa séquence de ciblage mitochondrial, assurant ainsi son intégration correcte dans le supercomplexe de la chaîne respiratoire.
• La protéine peut subir une méthylation post-traductionnelle, susceptible de réguler sa fonction ou son assemblage au sein du complexe ATP synthase.
• En tant que sous-unité centrale de l’ATP synthase, l’ATP5G1 joue un rôle universel dans la bioénergétique cellulaire, ce qui en fait un marqueur précieux pour les études de la fonction mitochondriale chez l’humain, la souris et le rat.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (aa 1 à 100) de l’ATP5G1 humain ; pour confirmer la spécificité, il est recommandé d’envisager des essais de compétition peptidique utilisant ce peptide immunisant avec une protéine recombinante de pleine longueur.
• En Western blot, l’ATP5G1 devrait apparaître sous la forme d’une bande d’environ 14 kDa ; utiliser des extraits enrichis en mitochondries ou des lysats cellulaires totaux de tissus humains, de souris ou de rat comme témoins positifs.
• Pour l’immunofluorescence (IF-P), une perméabilisation cellulaire approfondie est nécessaire pour détecter l’antigène de la membrane mitochondriale ; un co-marquage avec des marqueurs mitochondriaux (par exemple MitoTracker ou un anticorps anti-TOMM20) est recommandé pour vérifier la localisation.
• Lors de la réalisation d’un ELISA, optimiser la concentration de l’anticorps par titration et utiliser la protéine ATP5G1 recombinante ou des extraits mitochondriaux comme antigène de revêtement afin de garantir la sensibilité du test.

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