Anticorps polyclonal anti-ATP5F1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P24539

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATP5F1

• ATP5F1 code pour la sous-unité b de la tige périphérique de la F1F0 ATP synthase mitochondriale (Complexe V), une enzyme clé de la phosphorylation oxydative qui synthétise l'ATP en utilisant le gradient de protons à travers la membrane mitochondriale interne. Références associées : PMID:37244256
• Également connue sous le nom de sous-unité B1 du complexe F(0) de l'ATP synthase ou PIG47, cette protéine est un composant essentiel de la tige périphérique stationnaire, qui agit comme un stator pour maintenir le sous-complexe catalytique α3β3 et la sous-unité a/ATP6 statiques par rapport aux éléments rotatifs pendant la catalyse.
• Le complexe de l'ATP synthase est constitué d'un domaine de tête F1 soluble (cœur catalytique) et d'un domaine F0 intégré à la membrane (canal à protons), reliés par une tige rotative centrale et la tige périphérique qui inclut ATP5F1.
• Les études de localisation subcellulaire et les données de protéomique confirment qu'ATP5F1 réside dans la membrane interne de la mitochondrie, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction d'énergie.
• Des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation ont été identifiées sur ATP5F1, ce qui pourrait réguler l'assemblage ou l'activité du complexe de l'ATP synthase.
• La protéine est classée sous les mots-clés incluant CF(0), transport d'ions hydrogène, transport ionique et membrane mitochondriale interne, soulignant son implication directe dans la translocation des protons et la synthèse d'ATP.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé (résidus 1–245) couvre une grande partie de la protéine mature, ce qui peut produire des anticorps reconnaissant à la fois l'ATP5F1 natif et dénaturé ; envisagez de valider la détection dans des fractions enrichies en mitochondries ou des lysats cellulaires totaux.
• Pour les applications WB, une bande proche de 29 kDa est attendue ; optimisez la dilution de l'anticorps primaire et les temps d'exposition pour obtenir un signal clair avec un faible bruit de fond.
• Dans les expériences IF/ICC, vérifiez la localisation mitochondriale par une double coloration avec un marqueur mitochondrial (par exemple, MitoTracker ou un anticorps contre une protéine mitochondriale connue) pour confirmer la spécificité.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité entre lots peut survenir ; nous recommandons de tester chaque nouveau lot dans votre système d'essai avant de procéder à des expériences à grande échelle.
• Pour les applications ELISA, utilisez des conditions de revêtement appropriées et incluez un contrôle positif (par exemple, la protéine ATP5F1 recombinante) pour valider les performances de la plaque.

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