Anticorps polyclonal de lapin anti-ATP5C1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P36542

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATP5C1

• L'ATP5C1 (sous-unité gamma F1 de l'ATP synthase) est une sous-unité critique de l'ATP synthase mitochondriale F1F0 (Complexe V), l'enzyme responsable de la synthèse de l'ATP à partir de l'ADP et du phosphate inorganique en utilisant la force proton-motrice à travers la membrane mitochondriale interne. Références associées : PMID:37244256
• Cette protéine existe sous deux isoformes majeures : l'isoforme Cœur, exprimée principalement dans le muscle cardiaque et squelettique, et l'isoforme Foie, exprimée dans le cerveau, le foie, les reins, la peau, l'intestin, l'estomac et l'aorte, reflétant les besoins énergétiques spécifiques des tissus.
• En tant que sous-unité gamma de la tige centrale, l'ATP5C1 couple la rotation induite par le flux de protons dans le domaine membranaire F0 aux changements conformationnels de la tête catalytique F1, permettant la synthèse d'ATP. Elle joue également un rôle indispensable dans l'assemblage du cœur catalytique F1, comme en témoigne son exigence pour la formation d'un intermédiaire clé d'assemblage F1. Références associées : PMID:29499186
• L'ATP5C1 est localisée dans la membrane mitochondriale interne et contient un peptide de transit N-terminal qui dirige son importation mitochondriale. Elle est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité ou son assemblage.
• Le poids moléculaire prédit de l'ATP5C1 est d'environ 33 kDa (32996 Da selon UniProt), ce qui est cohérent avec la bande observée en Western blot.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps correspond aux acides aminés 26-298 de l'ATP5C1 humain (NP_001001973.1), qui couvre la majorité de la protéine mature après clivage du peptide de transit mitochondrial ; par conséquent, l'anticorps devrait détecter la forme mature endogène (environ 33 kDa) en Western blot.
• Pour les applications de Western blot (WB), envisagez d'utiliser des lysats protéiques enrichis en mitochondries provenant de lignées cellulaires ou de tissus (tels que le cœur, le muscle squelettique ou le foie) qui expriment l'ATP5C1, et incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés pour confirmer la bande à 33 kDa.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps en immunohistochimie (IHC) ou en immunofluorescence (IF), un signal fort peut être observé dans les tissus à forte teneur en mitochondries, comme le cœur et le muscle squelettique ; une co-marquage avec des marqueurs mitochondriaux peut aider à vérifier la localisation.
• Il est rapporté que l'anticorps réagit avec l'ATP5C1 humain, murin et de rat ; cependant, en raison des différences potentielles de séquence entre les espèces, il est conseillé de valider la réactivité croisée dans le système d'échantillons pertinent avant des expériences à grande échelle.
• Pour les applications ELISA et IF/ICC, il est recommandé d'effectuer une titration pour déterminer la dilution de travail optimale pour le type d'échantillon spécifique et les conditions expérimentales.

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