Anticorps monoclonal anti-ATP2B1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P20020

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ATP2B1

• ATP2B1 (PMCA1) est une pompe à calcium de type P qui couple l’hydrolyse de l’ATP à l’extrusion du calcium, ce qui est essentiel au maintien des niveaux basaux de calcium cytoplasmique. Références associées : PMID:35358416
• PMCA1 régule la pression artérielle en contrôlant le calcium intracellulaire et la production d’oxyde nitrique dans les cellules musculaires lisses vasculaires, influençant ainsi la vasoconstriction.
• Dans les os, PMCA1 favorise la minéralisation en facilitant l’absorption intestinale du calcium et en jouant un double rôle dans la différenciation et la survie des ostéoclastes via les oscillations et l’extrusion du calcium.
• PMCA1 module la sensibilité à l’insuline par l’activation dépendante du calcium et de la calmoduline d’AKT1 et de NOS3 dans les cellules endothéliales. Références associées : PMID:29104511
• Il pourrait également contribuer à la transmission synaptique en régulant la dynamique du calcium et des protons au niveau des vésicules présynaptiques.
• La protéine se localise dans la membrane plasmique, la membrane basolatérale et les membranes des vésicules synaptiques, reflétant la diversité de ses compartiments fonctionnels.
• Plusieurs isoformes (B, C, D, K) présentent une expression spécifique des tissus : l’isoforme B est ubiquitaire, C est exprimée dans le cerveau, le cœur et les muscles squelettiques, D dans les muscles fœtaux, et K dans l’intestin, le foie et l’épithélium endométrial.
• ATP2B1 est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation et la phosphorylation, et contient des domaines impliqués dans la liaison à l’ATP, le transport du calcium et la régulation par la calmoduline.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le western blot, prévoir une bande spécifique autour de 135 kDa dans des conditions réductrices ; il est recommandé d’utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de lignées cellulaires exprimant PMCA1.
• Lors de la réalisation d’une immunofluorescence ou d’une immunocytochimie, noter les profils de marquage attendus au niveau de la membrane plasmique et des vésicules ; une perméabilisation peut être nécessaire pour détecter les épitopes intracellulaires.
• Pour les applications ELISA, titrer l’anticorps dans un format sandwich standard ou indirect en utilisant une protéine recombinante ou un peptide pertinent afin de déterminer la concentration de travail optimale.
• Valider l’anticorps sur des échantillons humains, de souris ou de rat, en tenant compte du fait que la séquence de l’immunogène (aa 5-103) est conservée chez ces espèces.

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