Anticorps monoclonal anti-ATM pour WB, IHC-P, ELISA - Q13315

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATM

• ATM (Ataxia telangiectasia mutated) est une sérine/thréonine protéine kinase codée par le gène ATM, appartenant à la famille des kinases PIKK impliquées dans la signalisation des dommages à l'ADN.
• Il agit comme capteur primaire des cassures double-brin de l'ADN (CDB) et du stress génotoxique, tel que le rayonnement ionisant et la lumière ultraviolette A. Il reconnaît et phosphoryle les protéines substrat sur le motif consensus [ST]-Q pour initier la signalisation de point de contrôle, l'apoptose et la réparation de l'ADN. Références associées : PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365
• Il phosphoryle de nombreux effecteurs en aval, dont l'histone H2AX (en Ser-139), CHEK2, p53/TP53, BRCA1 et FANCD2, coordonnant ainsi l'arrêt du cycle cellulaire et les voies de réparation des dommages à l'ADN. Références associées : PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669
• Il se localise dans le noyau, où il médie principalement la signalisation des dommages à l'ADN, mais réside également dans les vésicules cytoplasmiques, les centrosomes et les peroxysomes, ce qui reflète ses rôles cellulaires divers.
• Il est largement exprimé dans les tissus humains : il est détecté dans le pancréas, le rein, le muscle squelettique, le foie, le poumon, le placenta, le cerveau, le cœur, la rate, le thymus, le testicule, l'ovaire, l'intestin grêle, le côlon et les leucocytes.
• Il régule la pexophagie en phosphorylant PEX5 au niveau des peroxysomes en réponse aux espèces réactives de l'oxygène, ciblant ce dernier pour l'ubiquitination et la dégradation. Références associées : PMID:26344566
• Des fonctions supplémentaires incluent le respect de l'exclusion allélique au cours du développement des lymphocytes B, le contrôle de la dégradation de l'ARNm des histones dépendante de la réplication, et un rôle potentiel de suppresseur de tumeur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 2619–2939 de l'ATM humaine, situé dans la région C-terminale. Validez la spécificité de l'anticorps avec des contrôles appropriés, notamment lors du ciblage d'isoformes ou de variants d'épissage.
• Pour le Western blot, l'ATM migre à environ 351 kDa. Utilisez des gels de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 6 à 8 %) et des temps de transfert prolongés pour garantir un transfert efficace de cette grande protéine.
• En IHC-P, optimisez les méthodes de récupération d'antigène (par exemple, la récupération épitopique induite par la chaleur) et la concentration de l'anticorps primaire. Envisagez d'utiliser des tissus à forte expression d'ATM, comme le testicule ou le pancréas, comme contrôles positifs.
• Une réactivité croisée avec la souris est rapportée ; si vous utilisez des modèles murins, confirmez l'adéquation en testant dans des systèmes de knock-out ou de knock-down appropriés.
• En tant qu'anticorps monoclonal, il offre une haute spécificité. Incluez des contrôles biologiques positifs et négatifs (par exemple, lignées cellulaires compétentes et déficientes pour ATM) pour vérifier l'identité de la bande.

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