Anticorps polyclonal de lapin anti-ATG7 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95352

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG7

• L'ATG7 est une enzyme activatrice de type E1 essentielle pour deux systèmes de conjugaison de type ubiquitine qui pilotent l'autophagie et le transport cytoplasme-vers-vacuole (Cvt).
• Il active ATG12 pour la conjugaison avec ATG5, et amorce les protéines de la famille ATG8 (comme LC3) pour la lipidation avec la phosphatidyléthanolamine, une étape cruciale pour l'association à la membrane de l'autophagosome.
• L'ATG7 facilite la conversion de LC3-I en LC3-II lipidée sur les membranes autophagosomales, un marqueur clé du flux autophagique. Références associées : PMID:34161705
• Au-delà de l'autophagie canonique, l'ATG7 est requis pour la mitophagie, contribuant au maintien de l'homéostasie mitochondriale et à la prévention d'une production excessive d'espèces réactives de l'oxygène (ROS).
• Il module l'activité de p53/TP53 pour influencer le cycle cellulaire et la survie sous stress métabolique, et participe à des processus tels que l'homéostasie axonale, le maintien des cellules souches hématopoïétiques, la formation des granules des cellules de Paneth et la différenciation adipocytaire.
• L'ATG7 contribue également à la régulation du rythme circadien en médiant la dégradation autophagique du répresseur de l'horloge CRY1, reliant ainsi l'autophagie à l'horloge hépatique et au métabolisme du glucose.
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme et les structures pré-autophagosomales, où elle orchestre les événements de conjugaison liés à l'autophagie.
• L'ATG7 est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés observés dans le rein, le foie, les ganglions lymphatiques et la moelle osseuse.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps correspond aux acides aminés 500–676 de l'ATG7 humain, une région proche de l'extrémité C-terminale bien conservée chez les mammifères. Cette conception peut contribuer à la réactivité croisée avec l'ATG7 de souris et de rat.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 78 kDa est attendue ; envisagez de charger une quantité de protéine adéquate et d'optimiser les conditions de transfert pour capturer la protéine pleine longueur.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), la coloration de l'ATG7 peut apparaître diffuse dans le cytoplasme avec un enrichissement potentiellement ponctuel au niveau des structures pré-autophagosomales dans des conditions d'induction de l'autophagie. Validez avec des marqueurs d'autophagie (par exemple, LC3) dans le tissu ou le modèle cellulaire pertinent.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection ; cependant, il est conseillé de l'apparier avec un anticorps apparié approprié et d'optimiser les conditions de revêtement pour une meilleure performance.
• Étant donné le rôle central de l'ATG7 dans l'autophagie, cet anticorps peut être utile pour surveiller le flux autophagique, la mitophagie et les voies associées. Incluez toujours des témoins appropriés (par exemple, des inhibiteurs de l'autophagie comme la chloroquine) pour garantir la spécificité de la dégradation autophagique.

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