Anticorps polyclonal Anti-ATG4D pour WB et ELISA - Q86TL0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG4D

• L'ATG4D est une protéase à cystéine (autophagine-4) appartenant à la famille ATG4, qui comprend ATG4A, ATG4B et ATG4C ; elle médie principalement la délipidation des protéines de la famille ATG8.
• Elle intervient dans l'autophagie par activation protéolytique et délipidation des protéines ATG8 (MAP1LC3 et GABARAPL2) ; elle clive l'acide aminé C-terminal pour exposer une glycine nécessaire à la conjugaison à la phosphatidyléthanolamine (PE) et à l'insertion membranaire. Références associées : PMID:21177865
• Elle médie la délipidation des protéines ATG8 conjuguées au PE pendant la macroautophagie, et délipide également les protéines ATG8 conjuguées à la phosphatidylsérine (PS) pendant l'autophagie non canonique au niveau des compartiments endolysosomaux. Références associées : PMID:29458288 PMID:33909989
• Elle joue un rôle dans la mitophagie en régulant le trafic d'ATG9A vers les mitochondries et en favorisant les contacts entre le phagophore et le réticulum endoplasmique, indépendamment de son activité protéasique. Références associées : PMID:33773106
• Elle relie le dysfonctionnement mitochondrial à l'apoptose : l'import mitochondrial d'ATG4D pendant le stress régule la physiologie mitochondriale, les ROS, la mitophagie et la viabilité cellulaire.
• Elle se localise dans le cytoplasme et la matrice mitochondriale.
• Elle est régulée post-traductionnellement par phosphorylation ; elle possède des variants d'épissage alternatif.
• Elle est largement exprimée, avec une expression maximale dans les testicules.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 265-474) correspond à une région qui peut conférer une spécificité pour ATG4D par rapport aux autres membres de la famille ATG4 ; vérifiez la spécificité à l'aide de contrôles positifs et négatifs.
• Pour le Western blot, validez l'anticorps sur des lysats cellulaires ou tissulaires humains et de rat ; une bande d'environ 53 kDa est attendue. Envisagez d'utiliser des conditions réductrices.
• Les applications ELISA peuvent être optimisées en utilisant cet anticorps polyclonal comme anticorps de détection dans un format ELISA sandwich avec un anticorps de capture adapté.
• Étant donné que l'ATG4D est impliqué dans l'autophagie et l'apoptose, les conditions expérimentales (par exemple, jeûne, stress mitochondrial) peuvent affecter les niveaux d'expression ; incluez des traitements appropriés.

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