Anticorps monoclonal de lapin Anti-ATG4B pour WB, IF, ELISA - Q9Y4P1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG4B

• ATG4B (également appelé APG4B, AUTL1, autophagine-1) est une cystéine protéase clé qui régule l'autophagie en médiant le traitement protéolytique et la délipidation des protéines de la famille ATG8, essentiel pour la macroautophagie, l'autophagie non canonique et la mitophagie. Références associées : PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651, PMID:33773106, PMID:33909989

• Il clive les acides aminés C-terminaux des homologues d'ATG8 (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2) pour exposer une glycine conservée, une condition préalable à leur conjugaison à la phosphatidyléthanolamine (PE) et à leur insertion dans les membranes autophagosomes. Références associées : PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• ATG4B agit également comme enzyme délipidante, déconjuguant le PE des protéines ATG8 pour faciliter leur recyclage ; il traite en outre les protéines ATG8 sur les structures à membrane unique lors de l'autophagie non canonique. Références associées : PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:29458288, PMID:33909989

• Dans la mitophagie, ATG4B favorise la croissance du phagophore indépendamment de son activité protéasique en régulant le trafic d'ATG9A vers les mitochondries et en permettant les contacts ER-phagophore pour le transfert de lipides. Références associées : PMID:33773106

• Parmi les quatre paralogues mammaliens d'ATG4 (ATG4A–D), ATG4B est la principale protéase pour l'activation d'ATG8, mais présente une activité de délipidation relativement faible par rapport à ATG4A et ATG4D. Références associées : PMID:29458288, PMID:30661429

• Au niveau subcellulaire, ATG4B se localise dans le cytoplasme, le cytosol, les autophagosomes, le réticulum endoplasmique et les mitochondries, ce qui est cohérent avec son rôle multiforme dans l'autophagie et les voies associées.

• Des modifications post-traductionnelles comprenant l'acétylation, la phosphorylation, la S-nitrosylation et la glycation ont été rapportées, régulant potentiellement son activité enzymatique et sa distribution subcellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé entre les résidus 200-300 de l'ATG4B humain, une région localisée dans le domaine catalytique. La réactivité de l'anticorps peut être influencée par des modifications post-traductionnelles ou des états conformationnels.
• Pour le Western blotting, l'ATG4B migre à environ 44 kDa. Les niveaux endogènes peuvent varier ; envisagez d'utiliser des inducteurs d'autophagie (par exemple, jeûne, rapamycine) pour améliorer la détection.
• Dans les applications d'immunofluorescence, l'ATG4B présente une distribution cytoplasmique ponctuée qui peut se colocaliser avec des marqueurs d'autophagosomes (par exemple, LC3) et des marqueurs mitochondriaux dans des conditions de mitophagie. Validez la spécificité dans des lignées cellulaires knock-out.
• L'anticorps est connu pour réagir de manière croisée avec l'ATG4B de souris et de rat ; cependant, l'alignement de la séquence de la région immunogène doit être vérifié pour les autres espèces.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour la quantification ; envisagez un format ELISA sandwich avec une paire d'anticorps adaptée.

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