Anticorps polyclonal de lapin anti-ATG4A pour WB, IF/ICC, ELISA - Q8WYN0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATG4A

• L'ATG4A est une cystéine protéase essentielle à l'autophagie, médiant à la fois l'activation protéolytique et la délipidation des protéines de la famille ATG8. Références associées : PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• L'activité protéase de l'ATG4A clive le résidu C-terminal des protéines ATG8 (incluant MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2) pour exposer une glycine, nécessaire à leur conjugaison au PE et à leur adressage aux membranes pendant l'autophagie. Références associées : PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• L'ATG4A catalyse la délipidation des protéines de la famille ATG8 conjuguées au PE, avec une activité de délipidation plus forte que l'ATG4B, contribuant ainsi au recyclage des protéines ATG8. Références associées : PMID:29458288, PMID:33909989

• Elle agit comme une enzyme de type déubiquitinante pour contrer l'ATG8ylation, clivant l'ATG8 de conjugués comme l'ATG3. Références associées : PMID:31315929, PMID:33773106

• Indépendamment de son activité protéase, l'ATG4A régule la mitophagie en contrôlant le trafic de l'ATG9A vers les mitochondries et en facilitant les contacts phagophore-réticulum endoplasmique pendant le transfert lipidique. Références associées : PMID:33773106

• L'ATG4A se localise dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'autophagie.

• Le gène ATG4A subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes, et est identifié dans des études protéomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 210–398 de l'ATG4A humain, une région pouvant inclure des domaines fonctionnels pertinents ; la préservation des épitopes et l'homologie entre espèces doivent être prises en compte lors de l'interprétation des données de réactivité croisée.
• Pour le Western blot en conditions réductrices, une bande proche de 45 kDa est attendue ; utiliser des lysats cellulaires ou tissulaires appropriés avec une expression confirmée d'ATG4A comme contrôles positifs.
• En immunofluorescence ou immunocytochimie, la localisation cytoplasmique de l'ATG4A doit être détectable ; optimiser les protocoles de fixation et de perméabilisation pour le type cellulaire spécifique.
• Les applications ELISA peuvent être développées en utilisant la protéine ATG4A recombinante ou des fragments peptidiques ; les conditions de dosage peuvent nécessiter une optimisation empirique.
• La réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat est indiquée ; valider la spécificité dans l'espèce cible en utilisant des modèles knockout ou knockdown lorsque cela est possible.

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