Anticorps polyclonal anti-ATG14 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZNE5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATG14

• ATG14 (également appelé Atg14L ou Barkor) est un régulateur clé de l'autophagie requis pour l'autophagie basale et inductible. Il fait partie du complexe PI3-kinase spécifique de l'autophagie PI3KC3-C1, dont il détermine la localisation. Références associées : PMID:18843052, PMID:19050071
• ATG14 favorise la formation d'autophagosomes et la conjugaison de MAP1LC3/LC3 à la phosphatidyléthanolamine, une étape critique de l'élongation des autophagosomes. Références associées : PMID:19270696, PMID:20713597
• ATG14 favorise la translocation de BECN1 du réseau trans-Golgi vers les autophagosomes. Références associées : PMID:20713597
• ATG14 augmente l'activité de PIK3C3 de manière dépendante de BECN1.
• ATG14 est essentiel pour la phosphorylation dépendante de l'autophagie de BECN1 et stimule la phosphorylation de BECN1 tout en supprimant la phosphorylation médiée par AMPK de PIK3C3. Références associées : PMID:23878393
• Il se lie au complexe t-SNARE STX17-SNAP29 sur les autophagosomes et le prépare pour l'interaction avec VAMP8, favorisant la fusion autophagosome-endolysosome. Références associées : PMID:25686604, PMID:37632749
• ATG14 se localise dans le cytoplasme, la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane de la structure pré-autophagosome et la membrane de l'autophagosome, ce qui reflète son rôle dans la biogenèse et la maturation des autophagosomes.
• ATG14 est une protéine à bobine pelotonnée qui subit un épissage alternatif ; elle est phosphorylée et ubiquitinylée, comme l'ont montré des études protéomiques.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 340–440) de l'ATG14 humain, qui est conservée entre les espèces, ce qui explique la réactivité croisée avec la souris et le rat. Une validation dans le système d'échantillon concerné est recommandée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 55 kDa est attendue ; il est recommandé d'utiliser des lysats de cellules entières ou des fractions subcellulaires pour les expériences d'induction de l'autophagie.
• Les protocoles IF/ICC doivent inclure une perméabilisation pour détecter l'ATG14 localisé sur la membrane des autophagosomes et d'autres compartiments ; l'utilisation de contrôles négatifs et positifs appropriés est recommandée.
• Pour les applications ELISA, une optimisation de la concentration de l'antigène de revêtement et de la dilution de l'anticorps peut être nécessaire ; inclure une courbe d'étalonnage pour l'évaluation quantitative.

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