Anticorps polyclonal Anti-ATG12 pour WB, IF/ICC, ELISA - O94817

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ATG12

• La protéine de type ubiquitine ATG12 (aussi appelée APG12-like) est un composant clé de la voie de l'autophagie, essentiel à la formation de l'autophagosome.
• ATG12 se conjugue à ATG5 via un système de type ubiquitine impliquant ATG7 (type E1) et ATG10 (type E2). Le conjugué ATG12-ATG5 agit ensuite comme une enzyme de type E3, favorisant la lipidation des protéines de la famille ATG8 et leur association aux membranes.
• Le complexe ATG12-ATG5, associé à ATG16L1, est nécessaire pour le recrutement de LRRK2 sur les lysosomes stressés et l'induction de l'activité kinase de LRRK2 en réponse au stress lysosomal (par similarité).
• Au niveau sous-cellulaire, ATG12 se localise dans le cytoplasme et sur la membrane de la structure pré-autophagosome, ce qui est cohérent avec son rôle dans les étapes précoces de l'autophagie.
• ATG12 est exprimé de manière ubiquiste dans tous les tissus humains, ce qui reflète son rôle fondamental dans l'homéostasie cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la formation d'une liaison isopeptidique avec ATG5. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et une structure 3D a été résolue (Identification protéomique ; Proéome de référence ; Voie de conjugaison Ubl).
• Au cours de l'infection virale, ATG12 agit comme un facteur proviral : le conjugué ATG5-ATG12 régule négativement la réponse immunitaire antivirale innée en altérant la production d'IFN de type I lors de l'infection par VSV ; il est également nécessaire à la traduction de l'ARN du HCV entrant dans la cellule et à l'initiation de la réplication, bien qu'il ne soit pas requis pour l'infection établie. Références associées : PMID:17709747 PMID:19666601

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu de la région N-terminale (aa 1–100) de l'ATG12 humain. Pensez à vérifier l'accessibilité de l'épitope dans votre type d'échantillon ; la récupération d'antigène standard n'est généralement pas nécessaire pour la WB.
• En Western blotting, attendez une bande à ~15 kDa pour l'ATG12 monomère. Le conjugué ATG12-ATG5 peut apparaître à un poids moléculaire plus élevé dans des conditions non réductrices ; incluez des contrôles appropriés pour distinguer les différentes formes.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, le profil de coloration attendu est cytoplasmique et ponctué (structures pré-autophagosomes). Une co-coloration avec des marqueurs de l'autophagie (par exemple LC3) peut aider à confirmer la spécificité.
• Cet anticorps polyclonal réagit de manière croisée avec l'ATG12 de souris et de rat, ce qui le rend adapté aux études inter-espèces. Validez systématiquement dans le fond d'espèce concerné.
• Comme pour tous les anticorps polyclonaux, une variabilité d'un lot à l'autre est possible. Incluez des contrôles positifs et négatifs dans chaque expérience et envisagez une titration pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio fournit aux fabricants de diagnostics, aux laboratoires et aux instituts de recherche un accès simplifié aux matières premières pour le diagnostic in vitro, y compris des anticorps validés pour la recherche sur l'autophagie et l'interaction hôte-pathogène. Au-delà de cet anticorps polyclonal anti-ATG12, nous fournissons des anticorps monoclonaux/polyclonaux optimisés, des paires d'anticorps, des réactifs auxiliaires en vrac, et nous pouvons aider à l'approvisionnement en matières premières pour des cibles rares — vous accompagnant tout au long de votre processus, du concept à la clinique.