Anticorps polyclonal de lapin anti-ATF6 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P18850

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l'ATF6

• ATF6 alpha (facteur de transcription ATF-6 alpha dépendant de l'AMP cyclique) est synthétisé sous forme de précurseur intégré à la membrane du réticulum endoplasmique (RE) qui, lors d'un stress du RE, subit une protéolyse intramembranaire régulée libérant le domaine actif du facteur de transcription. Références associées : PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11779464
• Le facteur de transcription maturé est transloqué vers le noyau et se lie aux éléments de réponse au stress du RE (ERSE : 5'-CCAAT-N9-CCAC[GA]-3' et ERSE II : 5'-ATTGG-N-CCACG-3') en coopération avec NF-Y afin d'activer les gènes cibles de la UPR. Références associées : PMID:10564271, PMID:11158310, PMID:11163209, PMID:11779464
• ATF6 peut également participer à la transcription dépendante du facteur de réponse sérique et intervient dans le développement de la fovéa ainsi que dans la fonction des photorécepteurs coniques de la rétine. Référence associée : PMID:26029869
• Au niveau subcellulaire, l'ATF6 circule entre la membrane du RE, la membrane de l'appareil de Golgi et le noyau selon son état d'activation.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la formation de liaisons isopeptidiques et la conjugaison de type ubiquitine, avec plusieurs sites de phosphorylation de la sérine/thréonine.
• Processus biologiques clés : activation, liaison à l'ADN, stress du réticulum endoplasmique, réponse aux protéines mal repliées.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 190–300 de l'ATF6 humain, une séquence située dans le domaine fonctionnel N-terminal. Cette conception peut favoriser la détection de la forme du facteur de transcription ; toutefois, une validation dans des conditions de stress du RE, par exemple après un traitement à la tunicamycine ou à la thapsigargine, est recommandée.
• En western blot (WB), l'anticorps peut détecter des bandes correspondant à l'ATF6 pleine longueur (environ 90–100 kDa) ou à la forme active clivée (environ 50 kDa), selon l'état de stress du RE cellulaire. Optimisez la préparation des échantillons et incluez des contrôles appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez une récupération antigénique induite par la chaleur et testez l'anticorps à plusieurs dilutions sur des coupes de tissus cibles.
• En immunofluorescence/immunocyt chimie (IF/ICC), une perméabilisation est nécessaire ; des profils de marquage à la fois dans le RE et dans le noyau sont attendus après l'induction de la UPR.

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