Anticorps pAb de lapin anti-ATF4 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18848

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ATF4

• ATF4, également connu sous les noms de CREB-2 ou TaxREB67, est un membre de la famille des facteurs de transcription ATF/CREB et joue un rôle essentiel dans l’adaptation cellulaire au stress et les processus métaboliques normaux.
• Il agit comme le principal facteur de transcription de la réponse intégrée au stress (ISR), son induction translationnelle ayant lieu après la phosphorylation d’EIF2S1 lors d’un stress du RE, d’une privation d’acides aminés, d’un stress mitochondrial ou d’un stress oxydatif. Références associées : PMID:31023583, PMID:32132707
• Il régule l’homéostasie métabolique en activant les gènes impliqués dans la synthèse des acides aminés (p. ex. ASNS), l’équilibre redox et la fonction mitochondriale, et peut soit favoriser la survie cellulaire, soit, lorsqu’il est associé à DDIT3/CHOP, déclencher l’apoptose. Références associées : PMID:11960987, PMID:18940792, PMID:15775988
• Il participe au développement osseux en favorisant la différenciation des ostéoblastes et la synthèse du collagène de type I, en partie par phosphorylation via RPS6KA3/RSK2. Références associées : PMID:15109498
• Il présente une localisation subcellulaire étendue, principalement dans le noyau, mais également détectée dans le cytoplasme, la membrane cellulaire et le centrosome.
• Il est soumis à diverses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l’acétylation, l’hydroxylation et l’ubiquitination, qui modulent son activité et sa stabilité.
• Il contribue à la régulation du rythme circadien en activant périodiquement l’expression de PER2 et de SLC6A4.
• Il interagit avec DISC1 dans les neurones pour réguler la plasticité synaptique et la mémoire à long terme ; il se lie également à l’élément amplificateur sensible à Tax du HTLV-I. Références associées : PMID:31444471

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 260–351) de l’ATF4 humain, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît probablement un épitope situé dans ce domaine ; envisagez un alignement des séquences lors de l’évaluation de la réactivité croisée avec d’autres espèces.
• L’expression d’ATF4 est fortement induite dans des conditions de stress ; pour détecter de faibles abondances, prétraitez les cellules avec des inducteurs du stress du RE (p. ex. la tunicamycine ou la thapsigargine) ou utilisez un milieu privé d’acides aminés afin d’améliorer le signal.
• Cet anticorps polyclonal peut détecter ATF4 à environ 39 kDa ; notez qu’ATF4 peut subir une dégradation rapide. Ajoutez donc des inhibiteurs de protéases et évitez les cycles de congélation-décongélation des lysats.
• Pour l’immunohistochimie ou l’immunofluorescence, des profils de marquage nucléaire et cytoplasmique peuvent être observés ; validez l’intensité de fluorescence dans des échantillons traités et non traités au stress.
• Étant donné qu’il s’agit d’un anticorps polyclonal de lapin, la constance entre les lots et les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque application et type d’échantillon.

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