Anticorps Monoclonal Lapin Anti-ATF3 pour WB - P18847

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'ATF3

• L'ATF3 (Activating Transcription Factor 3) est un facteur de transcription à leucine zipper basique (bZIP) codé par le gène ATF3. Il se lie à la séquence consensus de l'élément de réponse à l'AMPc (CRE) 5'-GTGACGT[AC][AG]-3' présente dans de nombreux promoteurs viraux et cellulaires.
• Il fonctionne comme un régulateur double : réprimant la transcription à partir des sites ATF en stabilisant les co-facteurs inhibiteurs au niveau du promoteur, et activant la transcription en séquestrant ces co-facteurs en dehors des promoteurs.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes. L'isoforme 1 agit comme un répresseur transcriptionnel, tandis qu'une isoforme induite par le stress contrecarre cette répression, soulignant un rôle dynamique dans la réponse au stress.
• Il est localisé dans le noyau, où il orchestre des programmes transcriptionnels en réponse à divers stimuli tels que les cytokines, les facteurs de croissance et les dommages à l'ADN.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l'ubiquitination (liaison isopeptidique), qui modulent sa stabilité, son activité et ses interactions protéiques.
• En tant que gène clé inductible par le stress, l'ATF3 est impliqué dans des processus tels que l'apoptose, la régulation du cycle cellulaire et les réponses immunitaires, le liant au cancer, à la neurodégénérescence et aux troubles métaboliques.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (acides aminés 1–77), ce qui peut permettre de reconnaître plusieurs isoformes. Validez la spécificité sur des lignées cellulaires humaines ou murines pertinentes, en notant le poids moléculaire variable (12–21 kDa) souvent observé en Western blot en raison des différences d'isoformes et des modifications.
• Pour le Western blot, optimisez les conditions réductrices et le pourcentage d'acrylamide pour résoudre les bandes de petites protéines ; envisagez d'utiliser des gels à 15 % ou des gels en gradient pour une meilleure séparation.
• Dans les expériences ChIP, les conditions de réticulation doivent être soigneusement titrées en raison de l'occupation transitoire des promoteurs par l'ATF3 ; l'anticorps peut convenir pour l'enrichissement suivi de qPCR ou de séquençage.
• Pour l'IP, les protocoles standard avec des lavages à faible stringence peuvent préserver les complexes d'interaction avec l'ATF3.
• La performance ELISA peut être évaluée en enrobant la protéine ATF3 recombinante ou des lysats ; l'anticorps peut potentiellement être utilisé comme réactif de capture ou de détection dans un format d'immunoessai sandwich.

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