Anticorps monoclonal de lapin anti-ASS1 pour WB, IF-P, ELISA - P00966

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’ASS1

• ASS1 code l’argininosuccinate synthétase, également connue sous le nom de ligase citrulline--aspartate (UniProt P00966).
• Catalyse la ligature dépendante de l’ATP de la citrulline et de l’aspartate pour former de l’argininosuccinate, une étape essentielle du cycle de l’urée pour la détoxification de l’ammoniac et la biosynthèse de l’arginine.
• Fonctionne dans le cytosol et est fortement exprimée dans le foie adulte, principal site de l’uréogenèse.
• Nécessite de l’ATP et la liaison aux nucléotides pour son activité de ligase.
• Est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction.
• Les mutations d’ASS1 sont associées à la citrullinémie de type I, une maladie autosomique récessive du cycle de l’urée.
• Les études structurales fournissent des informations détaillées sur le mécanisme catalytique de cette enzyme.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) de l’ASS1 humaine ; l’anticorps devrait donc se lier à la protéine complète ainsi qu’aux fragments N-terminaux.
• En Western blot, une bande autour de 47 kDa est attendue ; il est recommandé d’utiliser des contrôles de charge appropriés et des marqueurs de poids moléculaire.
• En immunofluorescence, un marquage cytoplasmique devrait être observé ; il est recommandé d’utiliser du tissu hépatique comme contrôle positif, compte tenu de la forte expression dans les hépatocytes.
• Une réactivité croisée avec l’ASS1 de souris et de rat est rapportée ; valider dans le système d’échantillons concerné avant les études à grande échelle.
• Pour l’ELISA, effectuer le test avec la protéine ASS1 recombinante ou des lysats cellulaires ; la concentration optimale de l’anticorps doit être déterminée expérimentalement.

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