Anticorps polyclonal de lapin anti-ASMT pour WB, IHC-P, ELISA - P46597

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ASMT

• L'ASMT (Acétylsérotonine O-méthyltransférase), également connue sous le nom d'Hydroxyindole O-méthyltransférase (HIOMT), est l'enzyme clé qui catalyse l'étape finale de la biosynthèse de la mélatonine : le transfert d'un groupe méthyle du S-adénosyl-L-méthionine sur la N-acétylsérotonine pour produire la mélatonine (N-acétyl-5-méthoxytryptamine).
• Le gène ASMT subit un épissage alternatif, résultant en plusieurs variants de transcrits qui codent pour différentes isoformes protéiques.
• Au niveau protéique, l'ASMT est principalement exprimée dans la glande pinéale, où elle joue un rôle critique dans la régulation des rythmes circadiens et de la reproduction saisonnière via la sécrétion de mélatonine.
• Dans la rétine, une très faible expression d'ARNm a été détectée, mais la protéine ASMT est absente, indiquant une régulation tissu-spécifique de cette enzyme. Références associées : PMID:7989373 PMID:8574683
• L'ASMT appartient à la superfamille des méthyltransférases et nécessite le S-adénosyl-L-méthionine comme donneur de méthyle pour son activité catalytique.
• La protéine est annotée sous le métabolisme des lipides, soulignant un lien potentiel entre la synthèse de la mélatonine et des voies métaboliques plus larges.
• Des études structurales (attestées par des annotations de structure 3D) ont révélé l'architecture du site actif de l'enzyme, facilitant la recherche sur son mécanisme catalytique et la conception d'inhibiteurs.
• La protéomique basée sur la spectrométrie de masse a confirmé l'expression de l'ASMT dans la glande pinéale, soutenant son utilité en tant que biomarqueur de la fonction pinéale.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-298 de l'ASMT humain (NP_001164510.1). Cette séquence quasi complète est susceptible de générer des anticorps reconnaissant de multiples épitopes linéaires, la rendant adaptée à la détection de protéines dénaturées en Western blot.
• Pour l'IHC-P, envisagez d'optimiser les conditions de récupération antigénique et la dilution de l'anticorps, car les anticorps polyclonaux peuvent présenter un bruit de fond plus élevé dans les tissus fixés au formol et inclus en paraffine.
• En ELISA, l'anticorps peut détecter l'ASMT recombinante ou native ; cependant, la réactivité croisée avec d'autres méthyltransférases doit être validée, en particulier lors du test d'échantillons provenant d'espèces présentant une forte homologie de séquence.
• Lors de l'utilisation de cet anticorps sur des tissus de souris ou de rat, confirmez la réactivité croisée par alignement de séquences ou titrage préliminaire, étant donné que l'immunogène est d'origine humaine.
• Pour le WB, attendez-vous à une bande d'environ 38 kDa ; des bandes supplémentaires provenant d'isoformes ou de modifications post-traductionnelles peuvent apparaître et doivent être vérifiées avec des contrôles appropriés.

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