Anticorps polyclonal de lapin anti-ASAH2 pour WB, ELISA - Q9NR71

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la céramidase neutre (ASAH2)

• L'ASAH2 code pour la céramidase neutre, un membre de la famille des céramidases, également connue sous le nom de BCDase, LCDase, N-CDase et HNAC1.
• Fonctionne comme une céramidase de la membrane plasmique qui hydrolyse les céramides en sphingosine et acides gras libres à pH neutre, et peut également catalyser la réaction de synthèse inverse. Références connexes : PMID:10781606, PMID:16229686, PMID:26190575, PMID:11278489, PMID:17475390
• Conjointement avec la sphingomyélinase, participe à la dégradation de la sphingomyéline pour produire les lipides bioactifs sphingosine et sphingosine-1-phosphate. Références connexes : PMID:16061940
• Joue un rôle dans la digestion des sphingolipides alimentaires dans le tractus intestinal (par similitude).
• Les céramides, la sphingosine et la sphingosine-1-phosphate régulent des processus cellulaires clés tels que la prolifération, l'apoptose et la différenciation. Références connexes : PMID:15946935, PMID:19345744, PMID:24798654
• La localisation subcellulaire comprend la membrane plasmique (radeaux/cavéoles), l'appareil de Golgi, la mitochondrie et la sécrétion dans l'espace extracellulaire (exosomes).
• Principalement exprimé dans l'intestin, avec une expression supplémentaire dans le rein, le muscle squelettique et le cœur ; notez que la détection ubiquitaire peut être influencée par le paralogue ASAH2B. Références connexes : PMID:17334805, PMID:10781606
• Contient des caractéristiques structurelles telles que des ponts disulfure, des sites de N-glycosylation, un domaine de liaison au zinc et des sites de phosphorylation/ubiquitination, reflétant sa régulation et son association membranaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 80–340, une région située dans le domaine extracellulaire de l'ASAH2. Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 86 kDa est attendue ; des conditions réductrices et dénaturantes sont recommandées pour résoudre avec précision la protéine glycosylée.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser la protéine recombinante immunogène comme témoin positif et optimisez les conditions de revêtement et les réactifs de détection pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.
• Compte tenu de la nature polyclonale, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée, et l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes ou produits de clivage — validez sur des lysats de tissus ou de cellules humains, de souris ou de rats pertinents.
• Les échantillons enrichis en sphingolipides (par exemple, tissus intestinaux ou rénaux) peuvent fournir une détection endogène optimale ; cependant, des étapes d'absorption croisée ou de blocage peuvent être nécessaires pour réduire la liaison non spécifique dans des matrices complexes.

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