Anticorps polyclonal de lapin anti-ASAH1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13510

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation d’ASAH1 (céramidase acide)

• ASAH1 code une enzyme lysosomale qui hydrolyse les céramides en sphingosine et en acides gras libres à pH acide, avec une efficacité catalytique plus élevée envers les C12-céramides (PubMed:10610716, PubMed:15655246, PubMed:7744740). Références associées : PMID:10610716 PMID:15655246 PMID:7744740
• L’enzyme catalyse également la réaction inverse, en synthétisant des céramides à partir de sphingosine et d’acides gras, avec une préférence pour la sphingosine D-érythro et les acides gras C12 ou C14 (PubMed:12764132, PubMed:12815059). Références associées : PMID:12764132 PMID:12815059
• ASAH1 présente également une activité d’hydrolase des N-acyléthanolamines, contribuant à la régulation des molécules de signalisation lipidique bioactive (PubMed:15655246). Références associées : PMID:15655246
• En régulant les niveaux de céramide, de sphingosine et de sphingosine-1-phosphate dans l’épiderme, ASAH1 intervient dans la différenciation des kératinocytes épidermiques induite par le calcium (PubMed:17713573). Références associées : PMID:17713573
• ASAH1 régule indirectement l’apoptose induite par le facteur de nécrose tumorale (TNF) par l’intermédiaire de l’équilibre entre la céramide et la sphingosine (par homologie).
• Dans les cellules corticosurrénaliennes, ASAH1 pourrait réguler directement la stéroïdogenèse en se liant au récepteur nucléaire NR5A1 et en régulant négativement son activité transcriptionnelle (PubMed:22261821). Références associées : PMID:22261821
• La localisation subcellulaire comprend le lysosome, mais ASAH1 peut également être présente dans le noyau, le cytoplasme et sous forme sécrétée.
• ASAH1 est largement exprimée, avec une expression plus élevée dans le cœur.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (acides aminés 140–389) couvre une grande partie de la séquence de la céramidase acide mature ; cette conception peut produire des anticorps reconnaissant à la fois le précurseur de pleine longueur et les formes clivées. Envisagez de valider la détection des isoformes dans votre système d’échantillonnage.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 45 kDa, mais le traitement peut générer des fragments plus petits. Utilisez des conditions réductrices et vérifiez les profils de bandes avec des contrôles appropriés, notamment dans les lysats humains, de souris ou de rat.
• Dans les expériences d’IF/ICC, les conditions optimales de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées afin de préserver la localisation lysosomale. Une co-coloration avec des marqueurs d’organites peut aider à confirmer la spécificité.
• Lors de l’utilisation de cet anticorps en ELISA, tenez compte de sa nature polyclonale pour le réactif de capture ou de détection ; l’association avec un anticorps monoclonal peut améliorer le rapport signal/bruit. Optimisez les conditions de revêtement et de blocage en fonction du format spécifique de votre essai.

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