Anticorps polyclonal de lapin anti-ARMET/ARP/MANF pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P55145

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de MANF (ARMET/ARP)

• Le facteur neurotrophique dérivé des astrocytes mésencéphaliques (MANF), également connu sous le nom de protéine riche en arginine (ARMET/ARP), est un facteur neurotrophique sécrété qui favorise la survie des neurones dopaminergiques et module la transmission GABAergique dans la substance noire. Références associées : PMID:12794311
• MANF inhibe la prolifération cellulaire et la mort cellulaire induite par le stress du réticulum endoplasmique (RE). Il est retenu dans le RE/réticulum sarcoplasmique par son association avec la chaperonne HSPA5/BiP dans des conditions normales et est sécrété en cas de stress du RE. Références associées : PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• Le MANF sécrété se lie au 3-O-sulfogalactosylcéramide (sulfatide) sur les membranes des cellules cibles, favorisant l'internalisation cellulaire par endocytose, ce qui est nécessaire pour son rôle dans l'atténuation du stress du RE et de la cytotoxicité dans des conditions hypoxiques. Références associées : PMID:29497057
• MANF est essentiel pour le développement pulmonaire embryonnaire, l'architecture de la pulpe blanche splénique postnatale, l'ossification endochondrale et la réparation du muscle squelettique, où il régule les transitions phénotypiques des macrophages pour limiter l'inflammation.
• Au niveau subcellulaire, MANF se localise dans la lumière du réticulum endoplasmique et du réticulum sarcoplasmique dans des conditions normales, et est sécrété en réponse au stress.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la formation de ponts disulfures, la phosphorylation et l'ajout d'acide sialique. MANF fonctionne dans les voies de réponse aux protéines mal repliées (UPR) et de réponse au stress.
• Les mutations de MANF sont associées à la surdité, au diabète sucré et au nanisme, soulignant ses rôles physiologiques diversifiés.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Conception de l'immunogène : L'anticorps a été élevé contre une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 25-182 du MANF humain, couvrant le polypeptide mature. Cette région est bien conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée.
• Western blot (WB) : Le poids moléculaire prédit est de 21 kDa ; cependant, considérez que les modifications post-traductionnelles (ex. glycosylation) peuvent provoquer de légers décalages de bandes. Validez avec des témoins positifs appropriés et envisagez des modèles d'induction du stress du RE pour évaluer la sécrétion régulée.
• Immunohistochimie (IHC-P) et immunocytochimie (IF/ICC) : En raison de la sécrétion et de la localisation RE de MANF, assurez-vous d'une perméabilisation adéquate et incluez des marqueurs du RE pour les études de colocalisation. Optimisez la récupération de l'antigène pour les sections incluses en paraffine.
• Immunoprécipitation (IP) et ELISA : La nature polyclonale offre une capacité robuste de capture et de détection. Pour un ELISA sandwich, envisagez un couplage avec un anticorps monoclonal reconnaissant un épitope distinct.
• Note générale : En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée dans votre système d'essai spécifique. Incluez toujours des témoins d'isotype et des témoins négatifs appropriés.

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