Anticorps polyclonal anti-ARF6 pour WB, IF/ICC, ELISA - P62330

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ARF6

• ARF6 (facteur 6 de ADP-ribosylation) est une petite GTPase de la famille ARF, codée par le gène ARF6, qui effectue un cycle entre les états inactive liée au GDP et active liée au GTP pour réguler de multiples aspects du trafic membranaire intracellulaire.
• En tant qu'acteur central du recyclage endocytique, ARF6 contrôle le retour des cargaison internalisées des endosomes de recyclage vers la membrane plasmique, facilitant le remodelage du cytosquelette et la migration cellulaire (PubMed:11266366, PubMed:16737952, PubMed:18400762).
  Références associées : PMID:11266366 PMID:16737952 PMID:18400762
• Sous sa forme liée au GTP, ARF6 médie le transport des protéines palmitoylées du réseau trans-Golgien vers la membrane plasmique, une fonction essentielle pour la sécrétion polarisée et l'acheminement des récepteurs de surface cellulaire (PubMed:37461827).
  Références associées : PMID:37461827
• ARF6 est indispensable à la cytodiérèse mitotique, il se localise au niveau du sillon de division et du corps médian pour assurer la bonne séparation des cellules filles.
• La protéine module activement la morphologie neuronale en régulant le développement des épines dendritiques, la ramification et l'extension des filopodes, et potentialise la croissance des neurites par interaction avec la protéine adaptatrice APBB1 (PubMed:14978216, PubMed:36250347).
  Références associées : PMID:14978216 PMID:36250347
• Pendant la polarisation épithéliale, ARF6 régit le remodelage jonctionnel en contrôlant les niveaux de surface des protéines de jonction d'adhérence telles que CDH1, et joue un rôle dans le recyclage de NTRK1 à partir des endosomes précoces (PubMed:36017701).
  Références associées : PMID:36017701
• ARF6 est également impliqué dans la pathogenèse microbienne : il active allostériquement la toxine cholérique et facilite l'entrée de l'entérovirus 71 dans les cellules endothéliales cérébrales.
• Exprimé de manière ubiquitaire avec des niveaux plus élevés dans le cœur, la substance noire et le rein, ARF6 se localise dans de multiples compartiments membranaires dont la membrane plasmique, les endosomes et l'appareil de Golgi, et il est modifié post-traductionnellement par myristoylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 1–175 de l'ARF6 humain, englobant le domaine de liaison au GTP N-terminal ; l'anticorps polyclonal obtenu peut détecter à la fois les conformations chargées en GDP et en GTP.
• L'analyse par Western blot devrait révéler une bande d'environ 20 kDa ; utilisez des lysats de lignées cellulaires ou de tissus humains, de souris ou de rat comme contrôles positifs.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, la coloration d'ARF6 est attendue au niveau de la membrane plasmique, des endosomes de recyclage et des vésicules intracellulaires ; les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour les cibles associées à la membrane.
• Les applications ELISA peuvent être développées en utilisant la protéine ARF6 recombinante ou des fragments peptidiques ; envisagez d'inclure des contrôles négatifs pour évaluer la liaison non spécifique.

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