Anticorps polyclonal anti-ARAP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96P48

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ARAP1

• ARAP1, également appelé centaurine-delta-2 (Cnt-d2), est une protéine Arf-GAP avec domaine Rho-GAP, répétition ANK et domaine PH de type 1 qui module le remodelage du cytosquelette d'actine.
• Il agit comme une GTPase-activating protéine dépendante du phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PIP3) pour les GTPases de la famille ARF et RHO, avec une préférence pour ARF1 et ARF5. Références associées : PMID:11804590, PMID:19666464
• ARAP1 régule positivement la taille de l'anneau des plis dorsaux circulaires et favorise la macropinocytose. Références associées : PMID:22573888
• Il régule le trafic endocytique de l'EGFR et l'incorporation de CD63 et CD9 dans les corps multivésiculaires. Références associées : PMID:18764928, PMID:18939958, PMID:21275903, PMID:38682696
• Au niveau sous-cellulaire, l'ARAP1 se localise dans le cytoplasme, l'appareil de Golgi (y compris le réseau trans-Golgien et la pile de Golgi), la membrane cellulaire, les endosomes (y compris les corps multivésiculaires et les endosomes précoces) et les projections cellulaires comme les plis et les podosomes.
• Il est largement exprimé dans les tissus, notamment le cœur, le muscle squelettique, la rate, le rein, le foie, le placenta, le poumon, les leucocytes du sang périphérique, la glande surrénale, la moelle osseuse, le cerveau, le ganglion lymphatique, la glande mammaire, la prostate, la moelle épinière, l'estomac, la thyroïde et la trachée.
• ARAP1 est une phosphoprotéine liant les métaux avec des domaines à doigt de zinc, et elle est soumise à un épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un fragment recombinant couvrant les acides aminés 834–1133 de l'ARAP1 humain, situé dans la région C-terminale. Cet anticorps peut reconnaître l'ARAP1 de pleine longueur et éventuellement des isoformes N-terminaux ou des fragments contenant la région de l'épitope.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 162 kDa. Il est recommandé d'utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6–8 %) et des marqueurs de poids moléculaire adaptés pour séparer les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie, l'ARAP1 présente une localisation multi-compartimentale (Golgi, endosomes, plis de la membrane plasmique, podosomes) ; par conséquent, il est recommandé de réaliser une co-coloration avec des marqueurs d'organites pour confirmer les signaux spécifiques.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec l'ARAP1 de souris et de rat, sur la base de la conservation de la séquence, ce qui le rend adapté aux études sur modèles rongeurs. Validez la dilution et les conditions dans le système d'échantillon concerné.
• Pour l'ELISA, cet anticorps polyclonal peut servir de réactif de capture ou de détection ; l'optimisation des paramètres d'enrobage et de détection est conseillée.

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