Anticorps polyclonal de lapin anti-APRT pour WB et ELISA - P07741

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'APRT

• APRT code pour l'adénine phosphoribosyltransferase, une enzyme de la voie de récupération des purines. L'isoforme canonique pèse environ 19,6 kDa, et l'épissage alternatif génère des variants supplémentaires.
• L'enzyme catalyse la conversion de l'adénine et du 5-phosphoribosyl-1-pyrophosphate (PRPP) en AMP et pyrophosphate, une réaction moins coûteuse en énergie que la synthèse de novo de l'AMP.
• L'APRT appartient à la famille des phosphoribosyltransferases des purines/pyrimidines et est essentielle pour le recyclage de l'adénine provenant de l'alimentation et du renouvellement des acides nucléiques.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, ce qui correspond à son rôle dans la récupération des nucléotides cytoplasmiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler l'activité ou la stabilité de l'enzyme.
• Les variations génétiques de l'APRT sont associées à un déficit en adénine phosphoribosyltransferase, un trouble conduisant à une urolithiase à la 2,8-dihydroxyadénine et à une insuffisance rénale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé correspond à la région N-terminale (aa 1–180) de l'APRT humain, qui présente une forte homologie avec l'APRT de souris, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Cet anticorps polyclonal peut détecter plusieurs isoformes de l'APRT en raison de l'épissage alternatif ; envisagez de vérifier le poids moléculaire attendu (~20 kDa) dans votre système d'échantillon.
• Pour le Western blot, incluez des témoins négatifs et positifs appropriés (par exemple, des lysats surexprimant l'APRT ou des tissus avec des niveaux d'expression connus).
• Pour l'ELISA, assurez-vous de la compatibilité du revêtement et envisagez de l'associer à un système de détection secondaire optimisé pour les anticorps polyclonaux de lapin.
• Étant donné la localisation cytoplasmique, des tampons de lyse doux sont recommandés pour une extraction efficace des protéines.

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