Anticorps polyclonal anti-apolipoprotéine D (APOD) pour IHC-P et ELISA - P05090

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'apolipoprotéine D

• L'apolipoprotéine D (APOD) est une glycoprotéine sécrétée de 21 kDa appartenant à la famille des lipocalines, identifiée pour la première fois dans les lipoprotéines de haute densité (HDL) du plasma humain.
• L'APOD participe à un complexe macromoléculaire avec la lécithine-cholestérol acyltransférase (LCAT) et est probablement impliqué dans le transport et la liaison de la biline.
• Cette protéine peut transporter divers ligands hydrophobes dans différents contextes physiologiques, ce qui suggère des rôles dans le métabolisme lipidique et la neuroprotection.
• L'APOD est majoritairement sécrétée et exprimée dans de multiples tissus, notamment le foie, l'intestin, le pancréas, les reins, le placenta, les glandes surrénales, la rate, le cerveau fœtal et les larmes.
• D'un point de vue structurel, l'APOD contient des ponts disulfures conservés et une modification acide pyrrolidone carboxylique, qui contribuent à sa stabilité et à sa fonction.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation ; la protéine mature ne possède pas de peptide signal et son poids moléculaire calculé est d'environ 21 kDa.
• En tant que membre du protéome de référence, l'APOD a été largement caractérisée par détermination de structure 3D et séquençage protéique direct, ce qui facilite la recherche de biomarqueurs et le développement de diagnostics.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 21 à 189 de l'APOD humaine mature, couvrant la majorité du domaine de liaison aux ligands ; cette conception favorise la détection des conformations natives et partiellement dénaturées.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), préférez des protocoles de récupération d'antigène adaptés aux protéines sécrétées ; un tampon citrate doux (pH 6,0) et un chauffage modéré peuvent améliorer l'exposition des épitopes sur les coupes incluses en paraffine.
• Pour les applications ELISA, le couplage de cet anticorps polyclonal avec un anticorps de capture monoclonal peut améliorer la spécificité du test ; optimisez les conditions de revêtement et de blocage en utilisant la protéine recombinante comme étalon de référence.
• Compte tenu de la nature sécrétée de l'APOD, la préparation d'échantillons à partir de lysats tissulaires ou de fluides biologiques doit inclure des inhibiteurs de protéases appropriés pour préserver l'intégrité de la protéine.
• Validez la spécificité de la coloration en comparant les intensités de signal entre des tissus connus pour exprimer des niveaux élevés (ex. foie, placenta) et faibles d'APOD, et incluez un contrôle négatif avec de l'IgG de lapin pré-immun.

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