Polyclonal Anticorps de Lapin Anti-ApoB (WB, IF/ICC, ELISA) - P04114

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Apolipoprotéine B-100

• L'Apolipoprotéine B (ApoB) est un constituant protéique majeur des chylomicrons (apoB-48), des LDL (apoB-100) et des VLDL (apoB-100). L'apoB-48 et l'apoB-100 sont issus du même gène par édition de l'ARN.
• L'apoB-100 agit comme signal de reconnaissance pour la liaison cellulaire et l'internalisation des particules de LDL par le récepteur apoB/E, jouant un rôle critique dans l'homéostasie du cholestérol.
• Au niveau sous-cellulaire, l'ApoB-100 se localise dans le cytoplasme, est sécrétée et s'associe aux gouttelettes lipidiques, ce qui reflète son rôle dans l'assemblage et la sécrétion des lipoprotéines.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la formation de ponts disulfure, la glycosylation, la palmitoylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction et sa stabilité.
• L'ApoB-100 contient des domaines de liaison à l'héparine et est impliquée dans l'athérosclérose, ce qui en fait une cible clé pour la recherche sur les maladies cardiovasculaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot (WB) : En raison du poids moléculaire élevé (~516 kDa), utilisez des gels de polyacrylamide à faible pourcentage (par exemple 4–6%) et des temps de transfert prolongés avec une quantité réduite de méthanol dans le tampon de transfert pour garantir un transfert efficace.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC) : Les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées, car l'ApoB est à la fois cytoplasmique et sécrétée ; une combinaison de perméabilisation au Triton X-100 avec une fixation au paraformaldéhyde peut être efficace.
• Pour l'ELISA : L'immunogène recombinant (acides aminés 28–330) peut servir de contrôle positif utile ; envisagez de tester une gamme de dilutions d'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• Validez la réactivité croisée de l'anticorps avec des échantillons de souris et de rat en utilisant des lysats de tissus ou de cellules appropriés, compte tenu de la haute homologie de séquence.

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